论文部分内容阅读
目的:本文以感染多房棘球蚴的长爪沙鼠和Balb/c小鼠为动物模型,分别研究了多房棘球蚴的感染对宿主肝脏药物代谢酶活性的影响,以及药物干预对泡型包虫病Balb/c小鼠肝脏药物代谢酶的调控作用。方法:用差速离心法制备肝微粒体悬液及细胞液,用二喹啉甲酸(BCA)法测定两者的蛋白浓度,继而用差示光谱法测定微粒体中细胞色素P450(CYP450)和细胞色素b5(Cyt b5)的含量,用荧光分光光度法测定7-乙氧基试卤灵脱乙基酶(EROD)、7-甲氧基试卤灵脱甲基酶(MROD)、7-戊氧基试卤灵脱戊基酶(PROD)的活性,用紫外-可见光分光光度法测定NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)和黄素单加氧酶(FMO)的活性。同时,通过测定泡球蚴组织块的湿重来评价阿苯达唑(ABZ)和3-溴丙酮酸(3-BrPA)的抗包虫效果,并用实时荧光定量PCR技术测定Balb/c小鼠肝脏组织中CYP1A1、CYP1A2、CYP2B10、CYP2E1、FMO1、FMO2、FMO3和GST基因mRNA的表达量。结果:1)在感染多房棘球蚴后,沙鼠和Balb/c小鼠肝脏中CYP450的含量均显著降低(p<0.05)。而沙鼠被感染后Cyt b5的含量也显著降低(P<0.05),Balb/c小鼠肝脏中Cyt b5的含量虽有所降低,但与对照组相比没有显著性差异(P>0.05)。酶活性测定结果显示沙鼠和Balb/c小鼠被多房棘球蚴感染后,肝脏中CPR的活性均显著升高(P<0.05),GST的活性则显著降低(P<0.05),EROD和MROD的活性没有变化(P>0.05)。然而,FMO的活性在被感染的沙鼠体内显著升高(P<0.05),在被感染的Balb/c小鼠体内则没有明显的变化。2)感染多房棘球蚴的Balb/c小鼠在口服阿苯达唑和3-溴丙酮酸六周后均呈现较强的抗泡球蚴效果(P<0.05),虽然阿苯达唑的抑囊率高于3-溴丙酮酸,但二者没有显著性差异(P>0.05)。当治疗时间增加至十周后,阿苯达唑的抗泡球蚴效果明显优于3-溴丙酮酸(P<0.05)。3)与模型对照组相比,感染多房棘球蚴的Balb/c小鼠在口服阿苯达唑之后,Cyt b5的含量增加(P<0.05),EROD、MROD和PROD的活性显著升高(P<0.05),CPR和GST的活性显著降低(P<0.05),FMO的活性没有变化(P>0.05);口服3-溴丙酮酸后,Cyt b5的含量增加(P<0.05),CPR和GST的活性降低(P<0.05),但是EROD、MROD和PROD的活性没有明显变化(P>0.05)。4)感染多房棘球蚴的Balb/c小鼠在口服阿苯达唑后,其肝脏中CYP1A1和CYP1A2的mRNA含量显著升高(P<0.05),FMO3和GST的mRNA含量降低(P<0.05),CYP1A2、CYP2B10、CYP2E1、FMO1和FMO2的mRNA含量则没有变化(P>0.05);而在口服3-溴丙酮酸后,FMO3和GST的含量降低(P<0.05),其余所测基因的mRNA含量没有变化(P>0.05)。结论:多房棘球蚴的感染会改变宿主肝脏药物代谢酶的活性,并且药物代谢酶活性的改变具有种族差异性。阿苯达唑和3-溴丙酮酸治疗泡型包虫病Balb/c小鼠时,二者均会在转录水平改变肝脏药物代谢酶亚型的表达,同时会影响Balb/c小鼠肝脏中部分药物代谢酶的活性。