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背景：人类免疫缺陷病毒I型(human immunodeficiency virus type1, HIV-1)感染会造成严重的免疫功能损伤,除了CD4+T细胞的不断耗损和功能损伤,HIV-1感染也能导致严重的体液免疫应答缺损。有报道称HIV-1感染者外周血B细胞数目减少,B细胞的亚群比例也出现紊乱,其中活化、耗竭和终末分化的B细胞亚群以及未成熟/过渡型B细胞增加,而CD27+记忆B细胞减少。B细胞表面活化分子、耗竭分子和凋亡分子表达增高,而抗凋亡分子表达降低,出现多克隆活化和抗原反应性低等功能损伤现象。这些研究进展多采用不同地区、以及不同疾病进展阶段的感染者为研究对象,病毒的分子特征也存在差异性。尤其是ART后长期存活的感染者处于慢性感染的过程中,这部分人的B细胞亚群的表型和功能损伤的免疫学特征与机制、以及上述它们与疾病进展相关性等均有待深入探索,以建立有效的免疫干预策略,修复B细胞的表型异常与功能损伤。本研究选取中国1995-1996年因有偿献血而集中形成的HIV-1长期慢性感染人群为研究对象,该人群的人口学特征、遗传背景、以及病毒分子特征均相近,以期在上述研究方向上有所突破。方法：按照知情同意的原则招募研究对象,分为3组：HIV感染未进行抗病毒治疗组(HIV-viremic,简称VI), HIV感染接受ART组(HIV-aviremic,简称AV),与HIV-1阴性健康组(HIV-negative,简称HN)。采集HIV-1慢性感染者和HIV-1阴性健康人静脉血分离外周血单个核细胞(PBMC)。首先进行B细胞表面分子染色以界定B细胞亚群：未成熟B细胞(CD19+CD10+CD27)、初始B细胞(CD19+CD10-CD21+CD27-)、静息记忆B细胞(CD19+CD10-CD21+CD27+)、活化记忆B细胞(CD19+CD10-CD21-CD27+)、组织样记忆B细胞(CD19+CD10-CD21-CD27-)和浆母细胞(CD19+CD10-CD21-CD27+CD20-)。同时分析活化分子(CD38)、细胞增殖分子(Ki-67)、凋亡相关分子(CD95、Bcl-2和PD-1)以及共刺激分子(CD40和CD70)的表达。利用流式细胞仪检测上述标志性分子的表达以及ART对B细胞表型的修复作用。随后,利用免疫磁珠负选法分选B细胞,进行B细胞功能性研究：用酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测抗原特异性(包括HIV-1膜蛋白gp120和流感膜蛋白HA特异性)的抗体分泌细胞表达水平；利用CBA(Cytometric Beads Assay)检测细胞培养上清中细胞因子的分泌水平。结果：所招募的HIV-1慢性感染者的外周血CD4+T细胞和B细胞数目都显著低于HN组(422±33个/μ1vs814±57个/μ1,p<0.01；156±19个/μl vs216±33个/μ1,p=0.05),在VI二者显著正相关(r=0.376,p=0.037),经ART后CD4+T细胞和B细胞数目有所恢复。VI组与HN组相比,B细胞亚群变化显著,未成熟B细胞、初始B细胞、静息记忆B细胞和浆母细胞显著降低,而组织样记忆B细胞显著增加,并且AV组初始B细胞和组织样记忆B细胞比例都有所恢复,但是静息记忆B细胞比例却没有恢复。HIV-1感染后,B细胞以及未成熟B细胞、初始B细胞、静息记忆B细胞和组织样记忆B细胞4个亚群上调表达活化分子CD38,和细胞增殖分子Ki-67的表达呈正相关(r=0.432,p<0.01)。凋亡分子CD95在静息记忆B细胞、活化记忆B细胞和浆母细胞上的表达水平较高；而抗凋亡分子Bcl-2的表达在初始B细胞、组织样记忆B细胞和浆母细胞3个亚群上显著降低；同时静息记忆B细胞和浆母细胞上调表达PD-1。共刺激分子CD40在所有B细胞亚群上的表达强度降低,而初始B细胞、静息记忆B细胞、活化记忆B细胞和组织样记忆B细胞上CD70的表达水平显著降低。HIV-1感染引起B细胞及其亚群上活化分子、凋亡分子以及共刺激分子的异常表达经抗病毒治疗后获得部分恢复。HIV-1慢性感染者B细胞功能损伤明显,Total IgG抗体分泌细胞(antibody-secreting cells, ASCs)由HN组的10600±2623ASCs/106B细胞显著减少至IV组的3818±931ASCs/106B细胞(p=0.05),且流感蛋白特异性ASCs也显著低于HN(22±7ASCs/106B细胞vs53±10ASCs/106B细胞,p=0.028),ART后改善不明显。HIV-1膜蛋白特异性ASCs在HIV-1感染后升高(163±58ASCs/106B细胞),抗病毒治疗后显著降低(30±8ASCs/106B细胞,p<0.01)。同时,HIV-1感染者B细胞分泌炎症细胞因子IL-10、IL-6和IL-8,以及LT-α和趋化因子CCL-3的能力显著低于健康人对照,ART并不能恢复B细胞分泌细胞因子的能力。结论：HIV-1长期慢性感染造成外周血B细胞数目减少以及亚群比例的变化,并且B细胞亚群表现出过度活化,极易发生凋亡以及B-T细胞相互作用受损等多种损伤表型。HIV-1长期慢性感染造成B细胞功能损伤,表现在抗原特异性抗体分泌细胞减少和细胞因子分泌能力降低。ART仅能部分修复HIV-1慢性感染者B细胞表型和功能的损伤。