课题组前期研究表明亚麻刺盘孢Colletotrichum lini CGMCC 34486对3-酮基甾体具有转化能力,为了进一步验证C.lini CGMCC 34486对3-酮基甾体的转化规律,本文选取依西美坦(6-亚甲基雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮)进行生物转化,分析其对依西美坦的转化情况,并对转化产物进行了分离纯化及结构鉴定。同时对依西美坦及其结构类似物的免疫调节活性进行分析,研究结构与免疫调节活性的关系,总结其构效关系,为揭示甾药构效关系提供基础数据。考查了 C.lini CGMCC 34486对依西美坦的转化情况。薄层色谱分析表明该菌可以转化依西美坦。通过X-射线单晶衍射,鉴定出3种产物的结构。通过检索发现其中2种化合物为首次报道,即为新化合物,分别是11α,15α-二羟基-6-亚甲基雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮和11α,7β-二羟基-6-亚甲基雄甾-1,4-二烯-3-酮。依西美坦发生了 11α和15α位的羟基化及C-17位酮基的还原,转化结果符合3-酮基甾体的亚麻刺盘孢转化规律。C.lini CGMCC 34486对3-酮基甾体都能进行11α和15α双羟基化反应,但双羟基化反应是否由同一个酶进行催化仍不清楚。论文进一步以转化率最高,特异性最好,与依西美坦结构相似的1,4-雄烯二酮(ADD)的亚麻刺盘孢转化反应为研究对象,通过放线菌酮抑制实验表明11α和15α羟基化反应是由不同的羟基化酶进行催化。此外还研究了依西美坦及其结构类似物免疫调节活性方面的构效关系,发现在诱导Th1细胞产生IFN-y方面,C-6亚甲基的引入能显著提高免疫活性。其次是化合物的极性(羟基个数),极性越大,活性越强。羟基个数相同时,主要受羟化位点的影响,C-11位和C-15位含有羟基基团的活性较高。C1,2位双键的引入也有助于提高活性。而在活化NK和NKT细胞方面,并没有发现结构与活性之间的相关规律。