OVCA1基因对人卵巢癌细胞系A2780细胞周期抑制的分子机制研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:xubin761
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目的:研究OVCA1基因对人卵巢癌细胞系A2780细胞内cyclinD1、p16、NF-κB的调节作用,探讨其是否通过调节cyclinD1的表达水平,发挥调节细胞周期、抑制肿瘤发生发展的作用,以及OVCA1基因通过那些直接或间接作用引起cyclinD1表达水平的变化,从而揭示OVCA1基因对A2780细胞的细胞周期抑制的分子机制。方法:选用A2780细胞(人卵巢癌细胞系A2780)与A2780-OVCA1细胞(单克隆的稳定表达OVCA1基因的人卵巢癌细胞株A2780)进行体外培养,采用成集落的细胞培养试验检测OVCA1基因对A2780细胞增殖活性的影响;RT-PCR技术检测细胞内cyclinD1、p16的mRNA表达水平;免疫细胞化学技术检测细胞内cyclinD1、p16、NF-κB的蛋白表达水平,对细胞内cyclinD1、p16的蛋白表达同时采用免疫荧光技术进行检测。结果:1. A2780-OVCA1细胞集落形成百分率为58.5040±3.8799%,A2780细胞集落形成百分率为78.8660±7.4908%,差异有统计学意义(P<0.01)。2. A2780-OVCA1细胞内cyclinD1的mRNA相对含量为0.9752±0.1055,A2780细胞内cyclinD1的mRNA相对含量为1.4154±0.1149,差异有统计学意义(P<0.01);A2780-OVCA1细胞内p16的mRNA相对含量为0.3562±0.0042,A2780细胞内p16的mRNA相对含量为0.1865±0.0111,差异有统计学意义(P<0.01)。3. A2780-OVCA1细胞中cylinD1的免疫细胞化学染色强度与免疫荧光染色强度均弱于A2780细胞,p16的两种染色强度均强于A2780细胞,通过平均光密度值比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。4. cyclinD1与p16的表达在mRNA水平与蛋白水平均不具有相关性
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