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目的:Graves’病(GD)是临床上最为常见的自身免疫性甲状腺疾病,而乳头状甲状腺癌(PTC)则是发病率最高的甲状腺恶性肿瘤。从病理学角度分别表现为甲状腺细胞的良性和恶性增生。目前涉及它们的发病机制仍在深入探索之中,其中原癌基因的表达即为当前研究方向之一。 原癌基因在正常组织中即有一定水平的微量表达,其对维持细胞的正常生理功能有着重要的作用。但在异常内外环境的影响下,其表达量可能发生改变,以致组织细胞发生病变。其中c-fos、c-jun、c-myc和h-ras是常见的原癌基因,它们对细胞的增殖、分化、转化均具有重要的调节作用,并在信号传导通路上可能存在着一定的联系。目前有关这四种原癌基因在GD表达情况的研究,国外少见,国内则未见报道,而有关这四种原癌基因在PTC表达情况的研究,结论尚有争议。本研究的目的是以组织细胞内的β-actin为内参照物,以正常组织为对照观察c-fos、c-jun、c-myc和h-ras在GD组和PTC组中的表达,为研究这两种疾病的发病机理提供依据。 方法:87例手术切除的甲状腺组织标本,包括:30例PTC、26例GD、31例腺瘤病变组织外的正常甲状腺组织。各组织标本均采用TRIzol法提取总RNA,RT-PCR法获取cDNA,多重PCR同时两两扩增内参照(β-actin)和目的基因(c-fos、c-jun、c-myc或者h-ras)。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,经英国UVP凝胶成像系统分析照相存盘,并用该系统的GelBase/GelBiot-Pro分析各标本的目的基因和内参照的密度值,计算两者比值,以反映目的基因表达量。 结果:1.在正常组、GD组和PTC组c-fos/β-actin的比值((?)±s)分别为:0.523±0.087、0.758±0.072、0.357±0.077;c-jun/β-actin的比值:0.521±0.077、0.739±0.080、0.451±0.098;c-myc/β-actin的比值为:0.367±0.044、0.599±0.080、0.682±0.111;h-ras/β-actin的比天津市自然科学基金资助项目天津医科大学硕士学位论文值分别为:0.413士0.051、0.457士0.102、0.776士0.117;2.四种原癌基因在三组病人中分别做方差分析,除了h一ras在GD组和正常对照组之间没有意义(户0.082),其他各组间均有统计学意义(只0.01);3.c一fos和c一jun在正常组、GD组和PTC组中的表达均呈正相关,(r值分别为:0.800、0.735和0.742,只 0.01);e一fos和C一jun与h一ras在Go组中的表达均呈正相关(r值分别为:0.521和0.794,只0.01);h一ras和c一myc在PTC组中的表达呈正相关(r=0.747,只0.01);4.c一myC和h一ras在PTC组中111期一IV期的表达高于I期一11期(e一mye为t= 4.663,只0.01;h一ras为t= 8.312,只0.01);c一fos和c一jun在PTC组中I期一H期和m期一W期的表达均未见显著性差异(分别为t= 1.217、P=0.243,t=o.345、P=0.733)。结论:c一fos、c一jun在GD组中表达显著升高,在PTC组中表达降低,且在GD组中的表达明显高于PTC组。c一myc在GD组和PTC组中表达均升高,且在PTC组中表达较GD组明显升局。3.h一ras在GD组中的表达较正常组有增高趋势,但无统计学意义,在PTC组中的表达较正常组和GD组升高。4.c一f。S和c一jun在GD组、PTC组和正常组中的表达均呈正相关关系。5.在GD组中h一ras与C一fos、C一jun的表达均呈正相关关系。6.在PTC组中c一myc和h一ras的表达呈正相关关系。7.在盯C组中c一myC和h一ras的表达在m期一IV期明显高于I期一H期;而C一fos和c一jun的表达与病理分期无关。