目的观察热应激对睾丸间质细胞凋亡的影响,并探讨牛磺酸改善热应激诱导睾丸间质细胞凋亡的机制。方法以睾丸间质TM₃细胞为实验对象,建立42℃热应激模型,热应激时间分别为Oh、1h、2h、4h、8h和16h。通过细胞形态学观察和MTT法检测不同时间热应激对TM₃细胞增殖率的影响;流式细胞术检测热应激对TM₃细胞凋亡率和线粒体膜电位的影响;通过蛋白免疫印迹法检测细胞内Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达,确定最佳热应激时间。牛磺酸（0、0.1、1、10μM）对37℃正常培养箱和42℃的热应激培养箱培养的睾丸间质TM₃细胞,分别保护12h,MTT法检测不同浓度牛磺酸对热应激诱导睾丸间质细胞增殖率的影响,确定最佳给药浓度;流式细胞术检测牛磺酸对热应激诱导睾丸间质细胞的凋亡率和线粒体膜电位的影响;最后通过蛋白免疫印迹法检测细胞内Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。结果1.倒置显微镜下观察,热应激Oh、1h、2h、4h、8h和16h的睾丸间质TM₃细胞贴壁数量逐渐减少,形态融合和皱缩现象明显。TM₃细胞热应激1h、2h、4h、8h、16h的MTT增殖率结果分别为101%、96%、88%、70%和48%。TM₃细胞热应激Oh、2h、4h、8h的总凋亡率结果分别为1.7%、2.8%、5.1%、12.8%;线粒体膜电位UR百分率分别为94.6%、91.0%、81.2%、79.5%,LR 百分率分别为 5.3%、9.0%、18.8%、20.4%;Bax/Bcl-2 蛋白随着热应激时间延长,表达含量逐渐增加,与对照组比较,热应激8h组Bax/Bcl-2蛋白表达显著增加,有显著性差异（P<0.01）;与对照组比较,Caspase-3蛋白热应激8h组Caspase-3蛋白表达显著增加,有显著性差异（P<0.01）。确定热应激时间为8h。2.牛磺酸（0、0.1、1、10μM）对37℃和42℃热应激诱导的TM₃细胞,MTT测得的增殖率分别为100%、95%、95%、92%;67%、72%、78%、77%。正常对照组和牛磺酸（0、1、10μM）对42℃热应激诱导的TM₃细胞总凋亡率结果分别为4.7%、19.4%、18.7%、13.1%;线粒体膜电位分别为UR百分率分别为 93.8%、85.4%、88.9%、87.7%,LR 百分率分别为 5.7%、14.5%、11.0%和 11.8%。与对照组比较,热应激模型组的Bax/Bcl-2、Caspase-3蛋白表达显著增加（P<001）;与热应激模型组比较,10μM牛磺酸给药组Bax/Bcl-2、Caspase-3蛋白表达降低（P<0.01）。结论热应激通过下调Bcl-2抗凋亡蛋白的活性,上调Bax/Bcl-2、Caspase-3促凋亡蛋白的活性,诱导睾丸间质TM₃细胞凋亡;牛磺酸可能通过抑制线粒体凋亡途径抵抗热应激诱导睾丸间质TM₃的细胞凋亡。