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目的:研究姜黄素壳聚糖微球对溃疡性结肠炎的治疗效果及作用机制。方法:将雄性SPF级BALB/c大鼠120只,随机分为正常对照、模型组、阳性对照组、姜黄素组、壳聚糖微球组、姜黄素壳聚糖微球组,每组20只,正常对照不做任何处理,其余组大鼠用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)7d诱导UC模型。正常对照组正常饮水及饮食,模型组:5%DSS自由饮水,正常饮食;阳性对照组:5%DSS自由饮水+含5g/L柳氮磺胺吡啶的饲料喂养;壳聚糖微球组:5%DSS自由饮水+含20g/L壳聚糖微球的饲料喂养;姜黄素组:5%DSS自由饮水+含20g/L姜黄素的饲料喂养;姜黄素壳聚糖微球组:5%DSS自由饮水+含20g/L姜黄素壳聚糖微球的饲料喂养。酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β、白细胞介素-6和白细胞介素-4的含量,免疫组化学染色检测结肠粘膜NF-κBP65及ICAM-1的表达,电镜及光镜下观察大鼠结肠组织病理及超微结构变化,计算结肠粘膜组织学损伤分数,评估疾病活动指数评分。结果:Ⅰ.酶联免疫吸附测定法检测模型组血清中IL-1β、IL-6含量分别为(71.13±2.58pg/ml)、(77.67±6.48pg/ml),IL-4的含量(49.12±8.46pg/ml),而阳性对照组IL-1β、IL-6及IL-4的含量分别为(52.11±1.43pg/ml)、(55.37±5.31pg/ml)、(60.11±6.220pg/ml),姜黄素组大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-4含量分别为(41.44±1.89pg/ml)、(36.79±7.98pg/ml)、(73.71±5.99pg/ml),壳聚糖微球组大鼠血清中L-1β、IL-6、IL-4含量分别为(59.79±1.78pg/ml)、(56.71±5.31pg/ml)、(65.39±9.63pg/ml),姜黄素壳聚糖微球组大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-4含量分别为(27.1±2.59pg/ml)、(25.83±9.15pg/ml)、(89.98±8.14pg/ml),正常对照组中的含量分别为(24.33±2.87pg/ml)、(30.3±7.69pg/ml)、(94.43±8.52pg/ml),由此可知姜黄素壳聚糖微球组血清中IL-1β、IL-6含量与正常对照组相比,无统计学意义(P>0.05),明显低于其他对照组,有统计学意义(P<0.05),姜黄素壳聚糖微球组IL-4含量与正常组对比无统计学差异(P>0.05),明显于其他对照组,有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ.光镜下观察:正常组大鼠未见淋巴细胞,浆细胞等炎症渗出,未见溃疡面,腺体结构层次清楚,黏膜排列整齐,完整,光滑。模型组大鼠结肠组织可见粘膜部分坏死,形成深浅不一的溃疡,固有层内有大量急慢性炎细胞,固有腺体隐窝脓肿形成,部分腺体增生形成息肉样结构,同时可见基底部淋巴细胞聚集。阳性对照组及壳聚糖微球组上述现象减轻,姜黄素组上述现象较轻,姜黄素壳聚糖微球组上述现象最轻。Ⅲ.电镜下观察:模型组可见黏膜表面及隐窝的上皮细胞被破坏,腺隐窝明显扩大,杯状细胞显著排空,黏膜组织内隐窝数量增加,部分隐窝形态扭曲,部分隐窝表面不规则,内质网扩张明显,线粒体明显肿胀,细胞膜孔数目减少,间质内可见大量淋巴细胞,腺体内杯状细胞减少,局灶隐窝脓肿形成。正常大鼠未见上述现象,阳性对照组及壳聚糖微球组上述现象减轻,姜黄素组上述现象较轻,姜黄素壳聚糖微球组上述现象不明显。Ⅳ.免疫组化学检测:在大鼠肠组织中激活的NF-κB P65蛋白转移到细胞核中,没有被激活的则留在细胞质中。因此HE染色后,能观察到细胞核以及细胞质都能被着色成棕黄色,NF-κB P65蛋白表达较多的结肠组织中黏膜固有层大量的单核细胞核颜色较深,NF-κB P65蛋白表达少的结肠组织中黏膜固有层大量的单核细胞质颜色较深,同时偶尔也看见少许结肠上皮细胞核或者细胞质呈现棕黄色。然而ICAM-1阳性表达主要集中在结肠黏膜中白细胞,中性粒细胞以及增生血管内皮细胞胞质中,这些被着色的炎性细胞的胞质呈现棕褐色。这些增生的血管主要集中在结肠黏膜内,偶尔见少数结肠上皮细胞内少量ICAM-1低水平表达。正常对照组中NF-κB P65及ICAM-1阳性表达不明显(10.52±3.51%,9.65±1.36%),模型组NF-κB P65蛋白的表达中细胞核着色最为明显,阳性表达率(52.12±8.81%),ICAM-1阳性表达主要以胞质着色明显,阳性表达率(68.16±7.05%),阳性对照组NF-κB P65,ICAM-1阳性表达率分别为(30.14±9.85%),(43.34±7.21%),壳聚糖微球组为(44.11±5.95%)、(53.40±8.79%),姜黄素组为(13.02±4.52%)、(15.30±3.95%),姜黄素壳聚糖微球组(11.10±3.68%)、(10.05±2.35%)。由此可见姜黄素壳聚糖微球组的阳性表达率与正常对照组对比,无统计学差异(P>0.05),明显低于其他组,有统计学意义(P<0.05)。Ⅴ.疾病活动指数评分:建模成功后可见大鼠活动性下降,懒动,饮食量下降,体重明显持续减轻,肉眼可见大便中带有鲜血。从用药干预到治疗结束,模型组大鼠疾病活动指数评分(7.03±1.09),阳性对照组(4.22±1.02),壳聚糖微球组(6.12±1.11),姜黄素组(2.43±1.09),姜黄素壳聚糖微球组(0.46±1.16),正常对照组(0.21±0.45)。姜黄素壳聚糖微球组疾病活动指数评分与正常对照组相比,无统计学差异(P>0.05),显著低于其他组,有统计学意义(P<0.05)。结论:(1).姜黄素壳聚糖微球治疗溃疡性结肠炎效果较单独的姜黄素及壳聚糖微球效果更显著,同时也比水杨酸类药物有着更好的治疗效果。(2).可能通过抑制NF-κB的表达,减轻炎症反应,通过抗炎作用而达到减轻小鼠溃疡性结肠炎中结肠组织的损伤。