论文部分内容阅读
目的淋巴增强因子1(1ymphoid enhancer factor 1, LEF1)是Wingless-type(Wnt)信号通路中的重要转录因子。LEF1通过其介导的信号通路在肿瘤的增殖、分化、侵袭和转移中起重要作用。已发现LEF1在淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia, CLL)和急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)等多种血液造血系统恶性肿瘤中有异常表达。成人急性淋巴细胞白血病(acute Lymphoblastic Leukemia, ALL)具有不同于儿童ALL的生物学特征,临床预后差。LEF1在成人ALL中的相关研究报道甚少,本研究旨在探讨成人ALL中LEF1基因突变、表达异常及其临床意义。方法采用荧光定量PCR (qPCR)的方法检测了131例初发成人ALL患者LEF1基因表达水平。针对LEF1外显子(exon)2和exon 3进行基因组聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增,通过直接测序或是克隆后测序分析LEF1突变。此外,对LEF1突变和表达与临床参数的相关性进行了分析。用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析,计数资料采用x2检验或Fisher精确概率检验进行差异性检验。骨髓中原始细胞百分比、白细胞计数(White blood cell, WBC)、血红蛋白(Hemoglobin, Hb)、血小板计数(Platelet, PLT)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)等计量资料采用非参数Mann-Whitney检验,生存时间分析采用Kaplan-Meier法。P<0.05为差异有统计学意义。结果本组131例成人ALL患者中LEF1突变率3.1%(4/131),均为点突变(位于外显子2和3)；初诊时外周血中位白细胞计数和中位原始幼稚淋巴细胞百分比在LEF1高表达组明显高于低表达组(70.6×109/L vs 26.2×109/L,P=0.010;81.0%vs 57.0%,P=0.014)；费城染色体阳性(Philadelphia chromosome positiVe,Ph+)ALL和高危患者比例LEF1高表达组显著高于低表达组(66.7%vs 36.5%,P=0.038;79.2% vs 56.2%,P=0.044)。本组标危患者中HLA-DR和CD19阳性率LEF1高表达组显著低于低表达组(20.0%vs 87.5%,P=0.007；20.0%vs 73.1%,P=0.042),而CD7阳性率LEF1高表达组明显高于低表达组(100.0% vs 44.0%,P=0.045)。初诊时发生脾大、淋巴结肿大的比例LEF1高表达组明显高于低表达组(分别为565%vs 29.5%,P=0.022;69.6% vs 43.8%,P=0.034)。结论LEFl高表达在ALL的发病机制和疾病发展中可能具有重要意义。LEF1有望成为成人ALL治疗中针对Wnt信号通路的新分子靶点。目的细胞因子受体样因子(cytokine receptor-like factor 2, CRLF2)通过激活JAK信号通路在淋巴祖细胞的分化增殖中起重要作用。(RLF2异常表达和JAK家族成员之间的关联性至今尚未完全阐明。而且,目前多数研究集中在儿童ALL成人ALL研究相对较少。本研究目的在于探讨成人ALL中CRLF2基因表达特征及JAKl和JAK2基因突变特征,以及相关的临床和预后意义。方法采用qPCR方法检测了133例初发成人ALL患者CRLF2基因表达水平。针对JAK1 exon 13、14、16、18、和19和JAK2 exon 16进行基因组PCR扩增,通过直接测序或克隆后测序分析JAK1和JAK2突变。用SPSS17.0统计软件进行统计学分析,计数资料采用x2检验或Fishe r精确概率检验进行差异性检验,骨髓中原始细胞百分比、WBC、Hb、PLT和LDH等计量资料采用非参数Mann-Whitney检验,生存时间分析采用Kaplan-Meier法。P<0.05为差异有统计学意义。结果本组成人ALL中CRLF2高表达患者占22.8%(28/123), B-ALL中Ph+ALL患者CRLF2高表达占55.6%。初诊时流式免疫表型CD34阳性率CRLF2高表达组显著高于低表达组(91.3% vs 62%,P=0.008),伴髓系抗原表达(CD13、CD33)阳性率CRLF2高表达组显著高于低表达组(分别为76.2%vs 46.3%,P=0.016；80.0% vs 37.9%, P=0.001),本研究中CRLF2高表达同时合并IKZF1基因外显子3-6缺失(异构体Ik6)患者占40%(4/10),本组Ph+ALL中发现5例存在Ik6,其中4例均为CRLF2高表达。此外,本研究显示CRLF2高表达组脾肿大发生率显著高于低表达组(60.0%vs 32.0%,P=0.040)。本研究发现JAK1突变4例,均为点突变且均伴有氨基酸序列改变。4例JAK1突变中3例均为JAK1 exon 16突变,1例为JAK1 exon 13突变。而且,本组研究显示JAK1突变组CRLF2表达明显高于无突变组(75%vs 21.3%,P=0.037)。本组非Ph阳性ALL患者CRLF2高表达组的OS和无事件生存时间(event-free survival, EFS)较低表达组明显缩短(分别为9.5个月vs 16个月,P=0.029；3个月vs 9个月,P=0.030)。结论CRLF2高表达和JAKl突变在成人ALL中具有重要预后意义,本研究发现的JAK1突变均未见报道,其深入功能研究可能进一步阐明JAK1在ALL的发生和发展中的作用,以及涉及CRLF2/JAK信号通路的可能调控机制。此外,本研究也提示成人ALL将来的预后模式可能将整合包括CRLF2、JAK1、IKZF1及其它新预后分子标记。