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Micro-RNA是一类长22-25nt的单链非编码RNA,是重要的转录后调控因子,参与生物体发育、细胞分化等生理过程。在多能性细胞中microRNA-145可以通过影响Oct4和Sox2基因的表达影响细胞多能性,调控细胞分化。microRNA-145在哺乳动物早期胚胎发育分化过程是否存在相同的作用机制目前尚不清楚。本研究拟以小鼠作为模型,通过原核显微注射microRNA-145过表达载体获得microRNA-145过表达小鼠胚胎,利用实时定量PCR检测小鼠早期胚胎及microRNA-145过表达胚胎中microRNA-145、Oct4和Sox2的表达变化,分析这种变化与胚胎发育分化的一致性关系,初步揭示microRNA-145在植入前胚胎发育分化过程的可能作用。围绕课题目标,本研究主要开展了三个方面的工作,结果如下：1、本研究优化了昆白小鼠超数排卵方案。研究结果显示：①对小鼠腹腔注射不同剂量超排激素(5IUPMSG+5IUHCG.5IU PMSG+IOIU HCG、10IU PMSG+5IU HCG和10IU PMSG+IOIU HCG),各组对小鼠超排效果的影响差异显著(分别为27.50枚/只、19.57枚/只、20.81枚/只、21.71枚/只,P<0.05),各组间的囊胚率差异亦显著(分别为77.27%、63.99%、65.68%、67.08%,P<0.05)。②对处于不同发情状态的昆白小鼠做超排处理,间情期组(29.52枚/只)与发情期组(29.12枚/只)超排结果差异不显著(P>0.05),间情期组囊胚率(65.82%)与发情期组囊胚率(64.70%)结果差异不显著(P>0.05)。2、本研究利用real-time PCR检测了小鼠早期胚胎发育分化过程中microRNA-145、 Oct4和Sox2的表达变化。研究结果显示：昆白小鼠在2-细胞胚胎、4-细胞胚胎、8-细胞胚胎及囊胚中microRNA-145的表达存在显著差异(P<0.05),其表达量随小鼠植入前胚胎发育分化不断升高；昆白小鼠2-细胞胚胎和囊胚中Oct4和Sox2的表达量存在显著差异(P<0.05),它们的表达量随胚胎发育分化不断降低。3、通过原核显微注射microRNA-145过表达载体,观察胚胎的后续发育及多能性转录因子Oct4和Sox2表达状况。结果显示：注射组的分裂率和囊胚率(74.72%；46.23%)与对照组(100%；76.44%)相比均存在显著差异(P<0.05)。利用real-time PCR检测注射组胚胎和对照组胚胎的microRNA-145、Oct4和Sox2基因表达水平,发现注射组胚胎中microRNA-145的表达水平有显著提高(P<0.05)；注射组中2-细胞胚胎和囊胚中Sox2的表达与对照组存在显著差异(P<0.05),而Oct4的表达各组差异不显著(P>0.05)。本研究结果说明5IU PMSG+5IU HCG激素组合适合昆白小鼠超数排卵及胚胎后续培养,小鼠不同发情状态对超排结果影响不显著；在小鼠植入前胚胎发育过程中,microRNA-145表达量上调与Oct4、Sox2基因表达量下调是随着小鼠植入前胚胎发育分化同时发生的；在小鼠植入前胚胎中,microRNA-145的过表达会导致胚胎发育分化能力下降,并导致Sox2基因在mRNA水平表达量显著下调。