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前言 肾母细胞瘤是小儿常见的恶性肿瘤,是由后肾胚芽细胞恶性增生所致,典型的改变是由胚芽细胞、发育不良的肾小管、及基质细胞构成,其端粒酶活性有很高的阳性表达。正常人体细胞中不表达或低表达端粒酶活性。人类85%以上的肿瘤细胞和永生化细胞具有高度的端粒酶活性。 端粒酶是合成端粒DNA的逆转录酶。其中端粒酶催化蛋白亚单位基因(telomerase reverse transcriptase,TERT)为端粒酶活性的必需和限速成分,其水平决定细胞端粒酶活性。为了解人端粒酶催化蛋白亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)在肾母细胞瘤中的表达情况,探讨hTERT mRNA的表达与肾母细胞瘤的临床分期、病理组织类型及预后之间的关系,我们采用RT-PCR技术,检测30例肾母细胞瘤标本(10例瘤旁组织作对照),观察hTERT mRNA的表达情况,结果报道如下。 材料与方法 一、临床资料 1.一般资料收集1999年1月至2003年12月,我科手术治疗肾母细胞瘤患儿30例。男14例,女16例,年龄在5个月-84个月。按SIOP临床分期标准:Ⅰ期13例,Ⅱ期6例,Ⅲ期10例,Ⅳ期1例。按NWTS3组织分型标准:上皮型10例、胚基型6例、间质型5例、混合型9例,同时采集10例瘤旁肾组织,年龄1.5岁-4岁。取材后,置入-80℃低温冰箱保存备检。 2.实验仪器和试剂RT-PCR试剂盒购于Takara Shuzo Co.Ltd.;hTERT-F,hTERT-R及β-actin引物购于Takara公司;TRIZOL试剂购于GIB-COBRL公司;自动电泳凝胶成像分析仪为日本OLumpus公司生产;PCR扩增仪PTC-100TM为美国公司生产。