【摘 要】
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背景肿瘤转移是肿瘤发展过程中最复杂、最致命的事件。肿瘤转移的启动依赖于肿瘤细胞与间质细胞的相互作用和单个细胞的上皮-间充质转化（EMT）。间质转化和异常渗漏的血管有助于肿瘤细胞的血管内渗,这里的进入血液中的肿瘤细胞依靠抗失巢凋亡以及抑制免疫细胞杀伤作用,进一步发生远处转移。失巢凋亡是一种细胞离开细胞外基质,而后发生凋亡现象的死亡方式。肿瘤细胞具有的抗失巢凋亡特性,是其在血液系统,淋巴系统中可以存活
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背景肿瘤转移是肿瘤发展过程中最复杂、最致命的事件。肿瘤转移的启动依赖于肿瘤细胞与间质细胞的相互作用和单个细胞的上皮-间充质转化（EMT）。间质转化和异常渗漏的血管有助于肿瘤细胞的血管内渗,这里的进入血液中的肿瘤细胞依靠抗失巢凋亡以及抑制免疫细胞杀伤作用,进一步发生远处转移。失巢凋亡是一种细胞离开细胞外基质,而后发生凋亡现象的死亡方式。肿瘤细胞具有的抗失巢凋亡特性,是其在血液系统,淋巴系统中可以存活以及远处转移关键之处。有研究表明凝血因子7（FⅦ）与肿瘤转移有关,所以探索凝血因子7（FⅦ）对抗失巢凋亡特性的影响。方法我们使用TCGA生物数据信息库来探究FⅦ表达与胃癌临床特征和预后的关系。并应用免疫组化染色法,分析了56例胃癌患者的癌组织,癌旁组织和淋巴结中FⅦ的表达情况。以及FⅦ的表达和患者的临床病理特征及预后的联系。分别对将胃癌细胞进行了贴壁以及悬浮培养,应用流式检测胃癌细胞的失巢凋亡率。对胃癌MKN45,AGS细胞进行FⅦ下调调控,验证了FⅦ对胃癌细胞失巢凋亡抵抗及侵袭转移的影响,并验证敲减FⅦ后凋亡通路,细胞内ROS活性的变化。使用SCID小鼠肝转移模型探究FⅦ对胃癌细胞转移能力的影响。结果（1）生物信息数据库预测发现,FⅦ在胃癌组织中高表达,而且FⅦ高表达的患者预后更差,在淋巴结转移的胃癌患者中,高表达FⅦ的胃癌患者生存时间较短;（2）胃癌组织样本及细胞水平中FⅦ在胃癌细胞与胃癌组织中高表达。FⅦ高表达的胃癌患者生存时间短,淋巴结转移,远处转移与FⅦ高表达是胃癌患者预后不良的独立危险因素;（3）对比胃粘膜正常上皮细胞（GES-1）,FⅦ蛋白水平在胃癌细胞中的表达升高,并且胃癌细胞MKN-45和AGS在模拟失巢状态下FⅦ的表达水平也升高,而在GES-1中未升高;（4）在贴壁状态下胃癌细胞的凋亡率较GES-1细胞低,但是无统计学差异;而失巢状态下,胃癌细胞的凋亡率显著小于GES-1细胞;（5）MKN-45,AGS在贴壁状态下,敲减FⅦ后凋亡率变化不明显,而在模拟失巢状态,凋亡率显著升高。FⅦ沉默后,MKN-45和AGS细胞的侵袭,迁徙与增殖能力显著减弱;（6）在肝转移SCID小鼠模型中,下调FⅦ组中肝转移灶的数目和大小均显著小于对照组;（7）下调FⅦ的表达后,凋亡通路相关蛋白表达水平升高;（8）下调FⅦ后,胃癌细胞中ROS活性升高,在悬浮状态下胃癌细胞中ROS活性升高具有统计学意义。结论胃癌的侵袭转移及生存和FⅦ的表达密切相关。FⅦ通过抑制ROS产生抑制caspase-3凋亡路径参与了胃癌细胞的失巢凋亡抵抗。针对FⅦ的特异性靶向药物有望成为抑制胃癌转移的治疗策略。
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