两种新型室温固化型PMMA复合材料对L929细胞增殖与凋亡的影响

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LeoPark
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目的:鉴于传统的室温固化型聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethyl methacrylate,PMMA)脆性大、韧性差以及表面粗糙易于细菌定植等缺点,本实验利用纳米银粒子(Ag Nanoparticles,AgNPs)与钛酸钾晶须(potassium titanate whisker,PTW)对室温固化型PMMA的抗菌性和机械性能进行增强,合成纳米银增强室温固化型PMMA复合材料(AgNPs-PMMA)与钛酸钾-纳米银增强室温固化型PMMA复合材料(PTW-AgNPs-PMMA),通过检测并比较上述两种新型复合材料对小鼠成纤维细胞(L929)增殖、氧化损伤和凋亡的影响来探讨其作为口腔应用材料的生物相容性,为其在口腔修复材料学领域的应用提供新思路。方法:采用化学反应与物理结合的方法合成AgNPs-PMMA、PTW-AgNPsPMMA。将上述材料浸提液分别与L929细胞共培养,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖情况,探讨不同材料、成分对L929体外增殖的影响;与此同时,检测L929细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,观察上述材料对细胞的氧化损伤的影响;实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real-time PCR,qPCR)测试它们对L929细胞促凋亡基因半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、8、9基因表达的影响。结果:成功合成AgNPs-PMMA、PTW-AgNPs-PMMA两种新型PMMA复合材料。两种材料浸提液分别与L929细胞共培养24小时,对L929细胞的增殖均有一定抑制作用,但与PMMA原材料组无明显差别,经计算,L929细胞增殖率(Relative Growth Rate,RGR)位于75%与100%之间,按照ISO 10993-5标准,细胞毒性评级为1级,初步确定该材料无细胞毒性。ROS含量检测结果发现,Ag NPs-PMMA与PTW-AgNPs-PMMA两组中L929细胞内活性氧含量均高于阴性对照组,并有显著差异(P<0.001),但与PMMA组均无显著差异。qPCR结果表明,PTW-AgNPsPMMA组凋亡基因Caspase-3、8的表达量均高于阴性对照组,其中Caspase-3的表达量高于PMMA组(P<0.01);而AgNPs-PMMA组仅Caspase-3的表达高于阴性对照组(P<0.05),且与PMMA组无差异。结论:本研究合成的AgNPs-PMMA、PTW-AgNPs-PMMA和商用PMMA对L929细胞的增殖都有一定抑制作用,但尚且属于无细胞毒性范畴,均促进L929细胞的氧化损伤和细胞凋亡,其中PTW-Ag NPs-PMMA对L929细胞的促凋亡作用更为明显,并且发现AgNPs和PTW的加入对于原PMMA在细胞ROS生成方面无显著影响。综上所述,AgNPs-PMMA的生物相容性与原PMMA相比无明显差异,PTW-AgNPs-PMMA与原PMMA相比可能会增强凋亡基因表达,其生物相容性有待进一步实验探究。
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