在动物生产中，通过应用免疫增强剂提高免疫功能，从而增强对病毒性传染病的抵抗力具有重要意义。然而目前常用的免疫增强剂大多是化学合成类，存在药物残留隐患。随着人们对食品安全的关注，天然药物显示出一定优势。研究表明，许多中药成分有免疫增强作用。多糖为一类重要的中药成分，不仅有抗病毒的作用，而且能增加机体的免疫能力，作为免疫增强剂具有安全低毒、不易在畜产品中产生有害残留等优点。本研究选择4种中药多糖为研究对象，从体内、体外两个方面研究了它们的增强免疫和抗病毒的作用和机理，旨在为开发多糖类免疫增强剂提供理论依据。研究分为以下8个部分：试验Ⅰ、四种中药多糖的制备为了给整个研究准备材料，选择文献报道具有较好免疫增强作用的黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、山药多糖（CYPS）、牛膝多糖（ARPS）4种中药多糖作为研究对象。采用水煎醇沉法提取，用硫酸蒽酮法测定多糖的含量。结果，APS、IRPS、CYPS、ARPS的提取率（g／Kg）分别为37.4、59.1、53.6、48.9，糖含量（％）分别为65.8、56.7、73.5、54.9。试验Ⅱ、四种多糖对新城疫病毒感染细胞能力的影响为了评价4种多糖的抗病毒作用和机理，将黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、牛膝多糖（ARPS）和山药多糖（CYPS）与新城疫病毒以3种顺序加入培养的鸡胚成纤维细胞单层上，即先加多糖、先接种病毒、病毒和多糖感作后同时加入，观察细胞病变程度，并用MTT法测定细胞OD值的变化，以评价它们对新城疫病毒感染细胞能力的影响。结果显示，APS和IRPS的效果较好，而且先加多糖后接种病毒可以减轻病毒造成的细胞病变，且有一定的量效关系。表明，多糖的临床应用以早给药的效果为好。试验Ⅲ、四种多糖对鸡脾脏淋巴细胞增殖及一氧化氮的影响为了研究4种中药多糖增强细胞免疫的作用和机理，将5种浓度的黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、牛膝多糖（ARPS）和山药多糖（CYPS）分别加入到培养的鸡脾脏淋巴细胞中，培养24h时收集细胞培养上清液，测定一氧化氮含量和一氧化氮合酶的活力；培养48h时用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化。结果表明，适宜浓度的4种多糖均能提高细胞培养液中一氧化氮的含量、一氧化氮合酶的活力和促进淋巴细胞增殖，且效果相当。这可能是多糖提高细胞免疫功能的机理之一。试验Ⅳ、四种多糖对鸡外周血淋巴细胞IL-4和IFN-γ的mRNA表达的影响为了研究4种中药多糖增强免疫的作用和分子机理，用Primer Premier软件设计了一对白介素-4（interleukin-4，IL-4）引物，一对干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）引物。用荧光定量PCR方法测定4种多糖对鸡外周血T淋巴细胞IL-4、IFN-γ的mRNA表达的影响。结果表明，合适剂量的APS、IRPS、ARPS和CYPS均能提高淋巴细胞IL-4、IFN-γ的mRNA表达水平，APS、IRPS的效果优于ARPS、CYPS。这可能是多糖增强免疫的分子机制之一。试验Ⅴ、四种多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能、溶血素及溶血空斑形成的影响及剂量筛选为了观察4种多糖对非特异性免疫功能的影响并筛选出合适的剂量，选取102只小鼠随机分为17组，16个试验组的小鼠分别腹腔注射4种浓度的黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、牛膝多糖（ARPS）和山药多糖（CYPS）溶液，对照组注射生理盐水，每天1次，连续3天。第8天分别测定腹腔巨噬细胞吞噬功能、溶血素及溶血空斑的变化。结果显示，4种多糖均能增强巨噬细胞的吞噬功能，提高溶血空斑及溶血素水平；APS在30 mg·kg^-1、IRPS在20 mg·kg^-1、ARPS和CYPS在50 mg·kg^-1时的效果较好。试验Ⅵ、四种多糖对免疫雏鸡抗体效价及免疫器官指数的影响为了研究4种多糖增强特异性体液免疫和非特异性免疫的作用和机理，选取450羽罗曼公鸡随机均分成9组，14日龄用新支二联弱毒苗点眼滴鼻首免、28日龄肌肉注射二免，在首次免疫的同时，8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、牛膝多糖（ARPS）和山药多糖（CYPS）溶液，对照组注射生理盐水，每天1次，连续注射3次。分别于首次免疫后第7、14、21、28、35、42、49和56天，用微量法测定新城疫HI抗体效价；于首次免疫后第10、20、30、40、50和60天，称取体重、脾脏、胸腺和法氏囊的重量，计算免疫器官指数。结果，低剂量的APS、IRPS和高剂量的ARPS、CYPS均能显著提高ND HI抗体效价和免疫器官指数，且低剂量的APS、IRPS效果较好。表明4种多糖既可以协同疫苗增强特异性免疫，也能促进免疫器官的发育以提高非特异性免疫。试验Ⅶ、四种多糖对免疫雏鸡T淋巴细胞增殖及其CD4⁺、CD8⁺亚群的影响为了研究4种多糖体内增强细胞免疫的作用和机理，选取450羽罗曼公鸡随机均分成9组，14日龄用新支二联弱毒苗点眼滴鼻首免、28日龄肌肉注射二免，在首次免疫的同时，8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖、板蓝根多糖、牛膝多糖和山药多糖溶液，对照组注射生理盐水，每天1次，连续注射3次。于首次免疫后第10、20、30、40、50和60天，分别用MTT法和流式细胞仪双染色法测定外周血T淋巴细胞增殖和CD3⁺、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞含量的动态变化。结果表明，4种多糖均能显著促进外周血中T淋巴细胞增殖，提高CD3⁺、CD3⁺CD4⁺T淋巴细胞含量和CD4⁺／CD8⁺的比值，低剂量的APS和IRPS的效果最好。这可能是4种多糖增强细胞免疫的机理之一。试验Ⅷ、四种多糖对免疫雏鸡黏膜免疫功能的影响为了研究4种多糖增强黏膜免疫的作用和机理，选取450羽罗曼公鸡随机均分成9组，14日龄用新支二联弱毒苗点眼滴鼻首免、28日龄肌肉注射二免，在首次免疫的同时，8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖、板蓝根多糖、牛膝多糖和山药多糖溶液，对照组注射生理盐水，每天1次，连续注射3次。于首次免疫后第10、20、30、40、50和60天，用ELISA方法测定空肠黏液中SIgA的含量，用免疫组织化学法测定盲肠扁桃体和十二指肠绒毛SIgA细胞阳性面积。结果，4种多糖均能显著提高肠黏液中SIgA的含量和盲肠扁桃体、小肠绒毛的SIgA阳性细胞数，低剂量的APS、IRPS和高剂量的ARPS、CYPS效果较好。表明，4种多糖可以有效地增强黏膜的屏障作用，从而提高机体的抗感染能力。