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本研究的实验材料:日本切花菊夏菊‘优香’,以此菊花品种的叶片作为外植体,建立了高效的菊花不定胚再生体系及其根癌农杆菌菌介导的遗传转化体系,在此基础上,通过将铁蛋白LcFER基因导入菊花基因组中,以期获得抗逆性的菊花新品种。具体研究内容及结果如下:1.以菊花的叶片为外植体,利用6-BA, NAA,2,4-D三种不同的植物生长激素对菊花胚性愈伤组织和不定胚进行诱导。筛选出诱导胚性愈伤组织和不定胚的最佳培养基,建立了高效稳定的菊花不定胚再生体系。实验结果表明:菊花叶片在MS+0.5mg/L6-BA+1.5mg/L NAA的诱导培养基中的出愈率高达100%,不定胚的诱导率达93%。将再生的菊花小植株转移到不添加任何植物生长激素的培养基中,再生植株可以生根,快速生长,再生率高达98%。2.在菊花再生体系建立的过程中,利用显微镜和石蜡切片对叶片外植体的不同发育时期进行形态学与组织学的观察,以期观察不定胚发生的过程。结果表明,叶片外植体经过愈伤组织诱导,经过原胚,球形胚、进而形成心形胚、子叶胚发育成完整小植株,从组织学观察结果可以看出新形成的不定胚与母体有明显的生理隔离,新生不定胚有自己独立的维管束系统,并不与其母体相连。证明菊花叶片外植体再生体系的建立是通过体胚发生途径而来的。3.本研究利用Gus基因瞬时表达建立了根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系。实验结果表明:预培养时间3d,叶盘在OD600值为0.5的根癌农杆菌菌液中浸染25min,共培养2d,抑制农杆菌生长的Cef浓度为300mg/L,25g/L甘露糖和28g/L木糖为转基因植株抗性筛选浓度。4.得到菊花转基因苗经过聚合酶链式反应PCR扩增,在一些转基因植株中检测出有目的基因存在,证明已经将目的基因成功导入菊花的基因组中。