冠心病气虚血瘀证小鼠模型Notch信号通路的变化及参参康心胶囊的干预作用研究

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冠心病属于全球性的人类健康问题,发病率、致死率高。近年来国内冠心病发病率也呈逐年增加趋势,已成为严重危害我国人民健康的问题。现代医学在冠心病诊断治疗领域取得较大进展,但是冠心病的发病机制的认识依然不完全清楚,尚无早期诊断和疾病不同阶段的特异性标志物。在治疗方面也存在一定的局限性与问题。中医药治疗冠心病由于具有个体化治疗特点,在缓解症状、改善生存质量等方面具备一定优势。冠心病的中医辨证证型中,气虚血瘀证是最为常见的证型之一。Notch信号通路在心脏及血管的发育和分化中起着重要作用,同时与心血管疾病的发生发展密切相关:在调控缺血缺氧损伤的反应、血管发生、心肌修复再生、抑制心肌细胞纤维化等过程中Notch信号通路都有重要作用,已成为现阶段冠心病领域研究的一个热点。目前国内有关冠心病及冠心病气虚血瘀证与Notch信号通路的相关性研究鲜有报道,因此开展冠心病气虚血瘀证与Notch信号通路的相关性研究具有一定的实际意义与理论意义。目的:研究冠心病气虚血瘀证模型小鼠心肌组织中Notch信号通路相关基因Notch1-4、Hes1、Hes5、Hey1、Hey2、Jagged1的表达,以揭示Notch信号通路与冠心病气虚血瘀证存在的相关性;同时根据“方证相应”理论,观察益气活血方剂——参参康心胶囊对Notch信号通路干预调节作用,进一步阐明冠心病气虚血瘀证Notch信号通路的变化。方法:选取SPF级昆明小鼠90只,随机分为6组,每组15只。除空白组外,其余各组采用饥饿、高脂饮食等复合因素诱导气虚血瘀模型。中药各组按组别给予高、中、低剂量的参参康心胶囊灌胃;阳性对照组给予地奥心血康灌胃;空白组、模型组给予等体积生理盐水灌胃。28天证型造模结束后,除空白组外,各组小鼠给予注射垂体后叶素诱导心肌缺血模型,检测心电图、计算气虚血瘀量表以验证冠心病气虚血瘀证模型是否复制成功。反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、琼脂糖电泳法检测各组小鼠心肌组织中Notch1-4、Hes1、Hes5、Hey1、Hey2、Jagged1的表达,并对结果进行半定量分析,IBMSpss Statistics19软件对数据进行统计分析。比较模型组与空白对照组之间Notch信号通路相关基因表达的差异,以及参参康心胶囊各组对冠心病气虚血瘀证小鼠Notch信号通路的干预作用。结果:与空白组相比,模型组小鼠心肌组织中Notch2、Notch3、Hes1、Hey2、Jagged1的表达量呈现上调趋势(P<0.05);Notch1、Notch4、Hes5、Hey1表达呈现明显下降趋势(P<0.05)。与模型组相比,各药物干预组能够下调Notch2、Hey2、Jagged1基因的表达(P<0.05),上调Notch1、Hey1基因的表达;与阳性对照组相比,参参康心方在调节Notch1、Hey1、Hey2、Jagged1基因表达方面存在一定优势(P<0.05)。结论:冠心病气虚血瘀证模型小鼠心肌组织中存在Notch信号通路相关基因表达的异常,提示Notch信号通路可能参与了冠心病气虚血瘀证发生发展的过程。益气活血方参参康心胶囊对冠心病气虚血瘀证具有一定的调节作用,其机制可能与调整Notch信号通路的相关基因表达有关。
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