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目的:以外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)为参照,探索浆膜腔积液(胸腔积液、腹腔积液、心包积液)T-SPOT.TB对儿童结核性浆膜炎(结核性胸膜炎、结核性腹膜炎、结核性心包炎)的诊断价值。方法:前瞻性地纳入2018年5月至2019年11月重庆医科大学附属儿童医院收治的疑似结核性浆膜炎的浆膜腔积液病人48例,收集浆膜腔积液及外周血标本,分离出浆膜腔积液单个核细胞(serous effusion mononuclear cells,SEMCs)和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)分别进行T-SPOT.TB检测,结合最终的确诊结果,计算灵敏度、特异度、阳性预测值(positive predictive value,PPV)、阴性预测值(negative predictive value,NPV)等,对比二者的诊断效能。结果:48例疑似患者中,22/48例(45.8%)临床及病原学确诊为结核性浆膜炎,22/48例(45.8%)诊断为非结核性浆膜腔积液,2/48例(4.2%)T-SPOT.TB检测结果不明确及2/48例(4.2%)失访病例未纳入最终分析。与外周血相比,浆膜腔积液T-SPOT.TB的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比分别为95.5%(95%confidence interval[CI]:75.1%-99.8%)和90.9%(95%CI:69.4%-98.4%)、86.4%(95%CI:64%-96.4%)和90.9%(95%CI:69.4%-98.4%)、87.5%(95%CI:66.5%-96.7%)和90.9%(95%CI:69.4%-98.4%)、95%(95%CI:73.1%-99.7%)和90.9%(95%CI:69.4%-98.4%)、7.02(95%CI:2.44-20.11)和9.99(95%CI:2.65-37.73)、0.05(95%CI:0.01-0.36)和0.1(95%CI:0.03-0.38),差异不具有统计学意义(P>0.05),两者具有良好的一致性(Kappa=0.909,P<0.05)。结核性浆膜炎病例中,SEMCs斑点(spot forming cells,SFCs)的频率为1960/5×10^5(四分位间距IQR:262.5/5×10^5-2335/5×10^5)明显高于PBMCs的斑点频率(Z=-3.667,P=0.001<0.05),并且SEMCs斑点频率大约是PBMCs斑点频率的4.5倍(IQR:2.3-8.6)。对SEMCs斑点频率进行受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析,最佳临界值为15个斑点每50万个浆膜腔积液单个核细胞,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.932,灵敏度和特异度分别为95.45%和81.82%,约登指数为0.7727。两者并联检测灵敏度及特异度为95.5%和86.4%,串联检测的灵敏度和特异度为90.9%和90.9%。结论:在结核高负担地区,与外周血相比,浆膜腔积液T-SPOT.TB诊断效能无明显差异,可能成为儿童结核性浆膜炎有效的诊断方法之一,15个斑点每50万个浆膜腔积液单个核细胞可能是诊断结核性浆膜炎的最佳截断值。