羊口疮(contagious ecthyma)又称羊传染性脓疱，该病传染性强，常呈群发性流行，羔羊和成年山羊均可因羊口疮病毒感染而发生本病。在羊口疮流行地区，羊口疮发病率达90%以上，死亡率达10%。患羊口疮的成年羊因采食困难，摄入营养不足，严重影响各项生产指标。新生羔羊患羊口疮则难以充分摄入母乳，严重影响羔羊生长发育，甚至饥饿死亡。羊口疮给山羊养殖造成的经济损失的问题，随着近年来我国山羊养殖数量和规模的迅速发展，显得日益突出。当前我国羊口疮预防现状是没有疫苗可供使用。本研究以羊口疮强毒分离株（FX0910株）为材料，进行了羊口疮灭活疫苗研制和FX0910株毒力致弱、安全性试验及免疫效果等研究。研究内容和结果如下：1FX0910强毒株的分离及灭活疫苗的研制与免疫效果评估本试验首先从羊口疮临床症状典型的奶山羊唇部采集结痂，获取毒液后过滤除菌，在犊牛睾丸原代细胞上增殖培养，采用Reed-Muench氏法测定病毒滴度，取P10病毒用0.4%甲醛溶液灭活48h，分别在羔羊口唇内部和细胞上接种病毒，鉴定病毒灭活效果。然后将灭活疫苗（109.1TCID50/只）腹股沟皮下接种15只羔羊后，观察羊体反应，检测灭活疫苗安全性。最后进行免疫试验，待孕羊分娩前42d、28d、14d分别颈部皮下免疫1次，免疫剂量为1mL。用ELISA法检测抗体效价水平，固定病毒稀释血清法检测中和抗体滴度，然后统计羊口疮灭活疫苗的保护率。结果显示：①犊牛睾丸原代细胞接种痂毒过滤液后，前4代羊口疮病毒接种细胞不产生病变。从P5开始，培养细胞接种羊口疮病毒3d后，出现细胞变圆、脱落、空洞等典型症状。羊口疮病毒滴度为108.1TCID50/mL；②灭活的病毒接种细胞和羔羊后，不能引起细胞病变，也不能导致羔羊发生羊口疮，灭活效果确实；将灭活疫苗接种羔羊腹股沟后，羔羊无发病、体温升高、厌食、等不良反应，灭活疫苗安全性良好；③免疫过的孕羊及所生羔羊的抗体效价分别为106、104左右，孕羊血清能中和100～200TCID50的羊口疮病毒，羊口疮灭活疫苗的保护率为60.1%。2FX0910强毒株的毒力致弱及免疫效果评估将分离的羊口疮病毒（FX0910株）在犊牛睾丸原代细胞上传至85代，采用Reed-Muench氏法测定病毒滴度；取P85病毒接种1月龄健康羔羊35只，于口腔粘膜处接种107.3个TCID50，进行安全性试验；免疫试验，选择1月龄羔羊，唇部划痕免疫，共免疫FX0910株P85病毒2次，每次间隔1周，免疫剂量为0.2mL/只（107.3TCID50/mL）。免疫后第7d，采集外周血分离淋巴细胞，MTT法检测抗原特异性淋巴细胞增殖情况。免疫后60d，选取18只羔羊，分成FX0910弱毒株免疫组和对照组，每组9只。进行攻毒试验，攻毒毒株为FX0910强毒株，攻毒剂量为100TCID50/只，统计羊口疮发病率。获得以下研究结果：①将羊口疮病毒连续传至85代，测定病毒滴度为107.3TCID50/mL；②P85病毒接种健康羔羊后，羔羊的划痕部位不出现水泡、脓胞、结痂等典型羊口疮病变，证明FX0910强毒株的毒力已经致弱，将其命名为FX0910弱毒株；③羊口疮抗原特异性淋巴细胞的SI值为2.88，显著高于未免疫羊；④对照组羔羊攻毒后，7d内全部在口唇部位出现羊口疮典型病变，FX0910弱毒株免疫组仅有2只羔羊于攻毒后第3d在攻毒部位出现轻微红肿，但随后红肿消失。其余羔羊均未出现任何羊口疮病变。其余免疫过的羔羊，在随后30d内，仅有2只羔羊出现羊口疮特征性病变，10d后康复。结论：1.本研究成功地研制出了羊口疮FX0910毒株灭活疫苗，该灭活疫苗能有效诱导机体启动体液免疫，产生中和抗体，对羔羊的保护率为60.1%；2.通过连续传代和动物试验，获得了1株羊口疮毒力弱化株病毒（FX0910弱毒株）；以其免疫羔羊，对羔羊的免疫保护率达到了98%以上。