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目的:近年来,LncRNAs在肿瘤发生、发展中的调控作用备受关注,LncRNAs可通过外泌体由肿瘤细胞分泌到体液中发挥相应的生物学作用。有研究表明,外泌体中的LncRNA可能成为各种癌症诊断和预后的潜在生物标志物。在本研究中,我们通过分析TCGA数据,筛选结直肠癌发生和预后相关的差异LncRN As分子,通过体内外功能实验对其生物学作用进行分析,通过 Gene Ontology(GO)及 Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析预测并验证相关信号通路,最后检测其在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达水平并明确其临床诊断价值。方法:通过对TCGA数据库中的结直肠癌测序数据进行分析,我们得到了14个在结直肠癌组织中低表达且与不良预后相关的LncRNAs分子作为候选分子:ADAMTS9-AS1,AL36536.1,KCNJ2-AS1,FGF14-AS2,AC129507.2,AC106739.1,MAFTRR,AL109955.1,TRHDE-AS1,AL136368.1,FO393418.1,LINC01571,AP003396.3 和 AC124017.1,然后提取结直肠癌组织RNA,对候选分子的表达水平进行验证,确定ADAMTS9-AS1和AL109955.1作为研究对象。接下来,我们通过一系列体内外功能实验对其生物学功能进行研究,并通过Gene Ontology(GO)及Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析预测并验证相关信号通路。随后,我们提取了 130对结直肠癌患者及健康志愿者的血清外泌体,通过透射电子显微镜(TEM)、免疫印迹技术(WB)、纳米粒径分析(NTA)等多种方法对所提取外泌体进行鉴定后,提取外泌体RNA并对ADAMTS9-AS1的表达水平进行检测,并结合相关临床病理信息确定其临床诊断价值。结果:我们从TCGA数据库共获取698例具有完整生存信息和临床病理参数的样本信息,其中包括51例正常结直肠组织RNA-seq数据和临床病理数据。通过R语言的“DESeq2”软件包、单因素Cox回归分析和Kaplan-Meier生存曲线,我们筛选并鉴定了两种新的lncRNA,ADAMTS9-AS1和AL109955.1,它们在结直肠癌组织中表达下调并与患者的不良预后相关。体内外功能实验表明,ADAMTS9-AS1能够明显抑制Wnt/β-catenin信号通路从而抑制细胞的增殖和侵袭转移,lncRNA AL109955.1可能通过影响Wnt、p53、Notch以及Jak-STAT等肿瘤经典信号通路抑制CRC细胞的增殖和迁移侵袭能力。最后,我们还发现外泌体中的ADAMTS9-AS1可以作为结直肠癌的潜在诊断标志物(AUC=0.835,95%置信区间=0.777-0.911)。结论:我们的数据表明,ADAMTS9-AS1和AL109955.1可能在结直肠癌发展中发挥肿瘤抑制作用,在结直肠癌的治疗和预后中具有潜在的临床应用价值。最后,外泌体lncRNA-ADAMTS9-AS1有望成为结直肠癌诊断和不良预后的潜在生物标志物。