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目的：通过循环应用小剂量环磷酰胺(CTX)和吉西他滨(GEM),探索二者单独及联合应用对荷瘤小鼠体内CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)和髓源抑制性细胞(MDSCs)的影响及抗肿瘤效应。方法：6-8周雌性C57BL/6小鼠皮下接种B16黑色素瘤细胞,随机分为生理盐水(NS)对照组、CTX组、GEM组、CTX+GEM组,另设无瘤正常对照,共五组。种瘤后第3、10、17天各组分别腹腔注射给药(CTX按照20mg/kg、GEM按照50mg/kg)。末次给药第4天,流式细胞术检测各组小鼠脾细胞中Treg占CD4+T细胞的百分比和MDSCs占脾细胞百分比；CCK-8法检测脾细胞中T、B细胞的增殖指数和NK细胞的杀伤活性；ELISA检测血清和脾细胞培养上清中IL-10、TGF-β1、IFN-γ的水平；化学比色法检测血清和脾细胞培养上清中NOS水平；同时记录小鼠的出瘤时间、肿瘤体积,并绘制肿瘤生长曲线。结果：1.各实验组小鼠脾细胞中Treg占CD4+T细胞的百分比均较NS对照组明显降低(P<0.05),但均高于无瘤正常对照组(P<0.05); GEM+CTX组与CTX组间无差异(P>0.05),但此两组均低于GEM组(P<0.05)；2.各实验组小鼠脾细胞中MDSCs占脾细胞的百分比均较NS对照组明显下降(P<0.05),但均高于无瘤正常对照组(P<0.05); GEM+CTX组与GEM组间无差异(P>0.05),但此两组均低于CTX组(P<0.05)；3.各实验组小鼠脾细胞中T、B细胞的增殖指数(SI)均较NS组明显升高(P<0.05)；GEM+CTX组和CTX组T细胞SI值与无瘤正常对照组无差异(P>0.05),但高于GEM组(P<0.05)；GEM+CTX组和GEM组中B细胞SI值与无瘤正常对照组无差异(P>0.05),但高于CTX组(P<0.05)；4.各实验组小鼠脾细胞中NK细胞的杀伤活性显著强于NS对照组(P<0.05),但低于无瘤正常对照组(P<0.05)；GEM+CTX组与GEM组无差异(P>0.05),但此两组均高于CTX组(P<0.05)；5.各实验组小鼠血清和脾细胞培养上清中IL-10、TGF-β1、NOS的水平均较NS对照组降低(P<0.05), IFN-y的水平均较NS组增高;CTX+GEM组血清和培养上清中IL-10、TGF-β1的水平均低于单独CTX组,也低于单独GEM组(P<0.05),而其IFN-γ均高于后两组(P<0.05)；CTX+GEM组血清和培养上清中NOS的水平均低于CTX组(P<0.05),但均与GEM组无差别(P>0.05)；6.各实验组小鼠的出瘤时间均较NS对照组延迟,且肿块体积均明显小于NS对照组(P<0.05),尤以CTX+GEM组小鼠的肿块生长最为缓慢。结论：1.荷瘤小鼠脾脏中MDSC和Treg的比例显著高于无瘤正常小鼠；2.小剂量CTX和GEM单独应用均可下调荷瘤小鼠脾脏中的MDSCs和Treg,均可能通过减少IL-10、TGF-β1、NOS的分泌,提高T、B细胞以及NK细胞功能,促进IFN-y的产生等机制提高小鼠抗肿瘤功能、延迟小鼠黑色素瘤的生长；但GEM对MDSCs、CTX对Treg下调作用更趋明显；3.小剂量CTX与GEM联合应用显示更强的下调MDSCs和Treg比例,减少IL-10、TGF-β1和NOS的分泌,提高T、B细胞和NK细胞功能,促进IFN-γ分泌等功能,小鼠体内无论是出瘤时间还是肿块大小,均较单独用药显示更强的抗肿瘤效应。