不同来源牛胎儿成纤维细胞中Bta-miR-21-5p与基因靶向关系的研究

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fancyyeast1
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Bta-miR-21-5p定位在牛基因组第19号染色体。目前已经发现差异表达的miR-21通过与靶基因相互调控来对细胞的生长、迁移和凋亡等方面起作用。本试验通过高通量测序的方法在转基因、克隆牛胎儿成纤维细胞中筛选出差异表达的bta-miR-21-5p,同时,通过生物信息学预测了bta-miR-21-5p的3种靶基因:成纤维细胞生长因子10(Fibroblast growth factor,FGF-10)、脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(Adipose triglyceride lipase,ATGL),来进一步验证bta-miR-21-5p与靶基因的靶向关系。通过在牛胎儿成纤维细胞和3T3-L1脂肪细胞中通过转染bta-miR-21-5p模拟物(mimic)和bta-miR-21-5p抑制剂(inhibitor)后,在mRNA水平和蛋白水平验证bta-miR-21与靶基因的靶向关系。体外转染试验结果显示,在转基因、正常牛胎儿成纤维细胞和3T3-L1脂肪细胞转染bta-miR-21-5p模拟物后bta-miR-21-5p的表达量上升,靶基因FGF-10和ATGL的表达量下降,转染bta-miR-21-5p抑制剂后bta-miR-21-5p的表达量下降,FGF-10和ATGL的表达量上升,说明bta-miR-21-5p的表达与FGF-10和ATGL的表达呈负相关,而LPL表达量的变化与bta-miR-21-5p的表达无明显相关性,miRNA的表达具有组织特异性和细胞特异性,所以还应该在不同细胞系中进行验证。
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