本论文对兽药新霉素的酶联免疫分析方法进行了研究。采用碳化二亚胺法（EDC）将新霉素与匙孔血蓝蛋白（KLH）连接制得免疫原免疫兔子,制备出高效价和高特异性的新霉素多克隆抗体。采用碳化二亚胺法（EDC）与辣根过氧化物酶连接制得酶标抗原,建立了一种高灵敏度直接竞争ELISA检测方法,IC₅₀为1.0±0.2μg/L,溶液中的最低检测限(IC₁₅)为0.1±0.01μg/L,低于以往关于新霉素直接竞争ELISA分析方法的报道,并对方法的精密度进行了考察,板内变异和板间变异的变异系数均低于20%。由于新霉素在畜牧业生产中广为使用,因此在动物源性食品中残留较多,故将所建立的方法应用于所选取的牛奶、猪肉、鱼肉、鸡肉、鸡蛋和猪肾六种样品中新霉素残留的快速检测,详细考查了不同样品基质对ELISA方法的影响及其去除方法,新霉素的最低检出限均低于最低残留限量（500μg/kg或μg/L）,分别对新霉素在六种实际样品中的添加回收率进行实验,回收率平均可达到75%～105%,可满足国标检测方法对检测灵敏度的要求,也可满足快速筛选方法的要求。因为新霉素无发色团,在紫外和荧光条件下无法被检测到,故需采用衍生的方法。选择邻苯二甲醛和巯基乙醇对新霉素进行衍生,研究了衍生反应的试验条件,建立了检测动物源性样品中新霉素残留的高效液相色谱检测方法,采用液相色谱法对建立的新霉素直接竞争酶联免疫检测方法的准确性进行了验证。两种方法检测结果的一致性很高,线性相关系数R²值在0.9以上。进一步对新霉素抗体和酶标抗原的稳定性进行了研究,抗体和酶标抗原可在4℃条件下放置6个月以上保持检测性能基本不变,为进一步开发并研制快速检测新霉素残留试剂盒奠定了基础。