海参中抗生素的生物富集、转化与多室毒代动力学模型

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海水养殖、河流携带和陆源排放等导致近岸海域抗生素污染。抗生素能导致菌群耐药性,有必要研究海水养殖生物中抗生素的生物富集和转化,为促进健康的海水养殖和抗生素类污染物的环境风险评价提供支持。海参(棘皮动物门,海参纲)是亚洲国家,尤其是中国重要的海水养殖经济物种。然而,抗生素是否能在海参中生物富集和转化尚不清楚;棘皮动物的毒代动力学模型仍然缺乏。因此,本研究以近岸海域中经常检出的抗生素为目标化合物,建立了海参中抗生素的分析方法,明确了残留特征,研究了生物富集和生物转化,构建了多室毒代动力学模型。主要研究内容和结果如下:(1)建立了海参中抗生素的分析方法。利用加速溶剂萃取(ASE)池内净化前处理,结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),建立了海参中6类共21种抗生素同时检测的分析方法。目标物包括10种磺胺类、4种氟喹诺酮类、3种酰胺醇类、2种β-内酰胺类、1中林可酰胺类和甲氧苄啶。优化后的ASE池内净化条件为:甲醇/乙腈(1/1,v/v)为提取溶剂,80℃,1500 psi,静态循环1次,静态时间5 min,2 g的C18作吸附剂。目标抗生素的加标回收率为50.1~129.2%,相对标准偏差低于22.3%,方法检出限为0.03~2.9 μg·kg-1。(2)分析了海参产品中抗生素的残留,并评价了通过食用海参暴露抗生素的健康风险。研究采集了我国4个海参养殖产地共计33个干海参和16个即食海参样品,基于建立的ASE池内净化结合UPLC-MS/MS分析方法,测定了样品中目标抗生素的残留水平。研究结果表明海参产品中共检出10种抗生素,最高检出浓度为32.8 μg·kg-1干重(磺胺甲噁唑),主要残留种类是磺胺类,其次是大环内酯和氟喹诺酮类。主成分分析法结果表明不同海域海参中抗生素的残留特征不同。即食海参产品中残留抗生素浓度略高于干海参。风险商值法结果表明食用海参导致抗生素暴露的健康风险是可接受的。(3)研究了海参中7种抗生素(包括磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、恩诺沙星、氧氟沙星、甲氧苄啶、克拉霉素和阿奇霉素)的生物富集和转化。以海参(Apostichopus japonicus)幼体为研究对象,开展了抗生素半静态式生物富集实验,计算了生物富集因子(BCF)。采集了野外养殖海参和周围海水样品,测定了样品中抗生素浓度,并估算了生物积累因子(BAF)。研究结果表明海参具有高的富集抗生素的能力,最大BCF值为1719.7L·kg-1(氧氟沙星)。基于实验室得到的BCF值和基于野外得到的BAF值的差异在10倍范围内。研究共发现7种抗生素的生物转化产物。海参消化道中生物转化产物浓度较高,表明海参消化道具有高的生物转化能力。(4)构建了海参中抗生素的多室毒代动力学模型。基于被动扩散及质量守恒原理,构建了海参中抗生素的多室毒代动力学模型。所建模型将海参划分为体壁、口、消化道、呼吸树和体腔液共5个室。88%的模型预测值与实测值的差异在5倍范围内,99%的预测值与实测值的差异在10倍范围内,表明了所建模型具有较好的预测准确性。研究结果表明被动扩散原理适合于构建海参的多室毒代动力学模型,所建模型可被应用于预测海参各组织中抗生素的时间变化浓度。综上,本研究建立了海参中抗生素的分析方法并证明了抗生素能在海参体内生物富集和转化,构建了海参中抗生素的多室毒代动力学模型。本研究结果可为推进海参健康养殖和开展抗生素环境风险评价提供依据和科学支撑。
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