子宫内膜炎是导致母畜流产、屡配不孕的重要原因,严重影响母畜的繁殖率和生产性能。子宫内膜炎的致病微生物和其致病因子,是导致子宫组织损伤、引起子宫内膜炎的主要原因。大肠杆菌、芽孢杆菌、化脓隐秘杆菌、链球菌、葡萄球菌等是导致子宫产后感染主要致病菌,脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）是子宫内膜炎致病菌大肠杆菌的致病因子,能够引起子宫内膜的炎症。尽管LPS引起的炎症反应已有诸多报道,但是仍不清楚LPS引起反刍动物子宫内膜炎的机制。反刍动物的子宫内膜炎发病率高且发病原因复杂,目前还没有有效的方法防治,因此,探究反刍动物子宫内膜炎的发病机理和分子机制具有重要意义。干扰素刺激基因15（Interferon stimulated gene,ISG15）是大小为15kD的类泛素样蛋白,ISGylation修饰系统是ISG15通过泛素化激活酶（UBE1L）、泛素化结合酶（UBE2E）和泛素化连接酶（HERC5）3种酶介导的活化、结合和连接发挥功能的类泛素化过程。ISGylation修饰作为一种重要的细胞调控机制,能够参与到炎症反应、免疫调节、抗病毒、肿瘤发生等疾病发生过程中。研究已经证明ISGylation在LPS诱导的炎症中发挥作用,但ISGylation在反刍动物子宫内膜炎中的具体作用机制还需深入研究。本研究通过使用LPS诱导体外山羊子宫内膜上皮细胞（Goat endometrium epithelial cell,gEEC）构建炎症模型,采用q RT-PCR、Western blot、免疫荧光技术以及小干扰和过表达技术,来探究ISGylation修饰系统在LPS诱导的gEECs炎性反应中的作用以及ISGylation修饰系统与炎症通路之间的联系,为揭示ISGylation修饰系统在山羊子宫内膜炎中的作用机制奠定基础。主要结果如下:（1）免疫荧光显示,5μg/mL LPS处理gEEC,ISG15在gEEC中主要表达于细胞质,少量表达于细胞核;在转录水平上,LPS处理gEEC不同时间,ISG15、UBE1L、UBE2E、HERC5、USP18表达量显著上调,但在3 h、6 h时,UBE2E、USP18表达无显著性差异。（2）5μg/mL LPS处理gEEC后,过表达ISG15可极显著下调炎性因子和炎症通路相关基因的表达;干扰ISG15,炎性因子和炎症通路相关基因表达上调极显著;未经5μg/mL LPS处理,过表达ISG15可以显著下调炎性因子IL-1β、IL-8的表达;干扰ISG15,IL-6的表达显著上调,IL-1β无显著性差异,TLR4表达上调极显著,NF-κB p65表达无显著性差异。（3）5μg/mL LPS处理gEEC,过表达ISG15可使NF-кB p65蛋白的磷酸化作用显著降低;干扰ISG15后NF-кB p65蛋白的磷酸化作用显著上调。（4）免疫荧光结果显示,经过5μg/mL LPS处理,过表达ISG15,显著下调NF-кB p65的入核作用;干扰ISG15后,NF-кB p65的入核作用显著上调。综上所述,本研究发现ISGylation修饰系统在LPS诱导的山羊子宫内膜炎症中被激活,且ISG15能够通过NF-кB p65通路下调炎症相关因子的表达,从而对山羊子宫内膜炎进行调控。