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低聚糖具有调节肠道菌群、润肠通便以及提高机体免疫力等功能,目前已经被应用于婴儿配方奶粉中帮助新生儿建立体内肠道菌群。婴儿配方奶粉中应用最多的是低聚半乳糖(GOS)和低聚果糖(FOS)以及两者的组合。国家标准GB 14880-2012中规定,低聚糖组合总含量不得超过6.45 g/100 g。国家标准对低聚糖的允许添加范围规定非常广泛,导致各品牌婴儿配方奶粉中低聚糖含量虽在国标范围内,但是彼此之间差异非常明显,而且关于奶粉中不同低聚糖添加量对肠道益生功能的影响研究也比较局限。婴儿配方奶粉中低聚糖不同添加量对肠道益生功能的影响是否具有显著差异,在安全基础上,低聚糖添加量达到多少时可以对肠道益生功能具有最佳影响还需要深入探讨。因此本试验通过对益生菌活菌数的测定以及后续小鼠试验,来探究婴儿配方奶粉中GOS和FOS不同添加量对肠道益生功能的影响,并以此确定本试验最终奶粉配方的低聚糖最佳添加量,为婴儿配方奶粉中益生元的添加以及消费者的选择提供理论依据。本文通过体外试验确定婴儿配方奶粉中低聚糖的混合比例,再以此混合比例为基础,通过对双歧杆菌和嗜酸乳杆菌活菌数以及小鼠肠道菌群和润肠通便功能的测定,来探究婴儿配方奶粉中低聚糖添加量对肠道益生功能的影响,具体研究内容和结果如下:(1)婴儿配方奶粉中低聚糖混合比例的确定:本试验通过对OD值、双歧杆菌和嗜酸乳杆菌活菌数以及pH值的测定,选取8:2为GOS和FOS的最佳配比。在此配比组中,双歧杆菌和嗜酸乳杆菌活菌数分别可以达到4.18×10~9 cfu/ml和6.63×10~9 cfu/ml,显著高于其他配比组(P<0.05)。因此最终选取混合比例为8:2的GOS和FOS进行后续试验。(2)婴儿配方奶粉中低聚糖添加量对双歧杆菌和嗜酸乳杆菌活菌数的影响:婴儿配方奶粉中低聚糖添加量不同,导致奶粉中双歧杆菌和嗜酸乳杆菌的活菌数也不同。当低聚糖添加量为6 g/100 g时,双歧杆菌活菌数可以达到5.23×10~9 cfu/ml,嗜酸乳杆菌活菌数达到6.8×10~9cfu/ml。当低聚糖添加量为5.5 g/100 g时,双歧杆菌活菌数为4.93×10~9 cfu/ml,嗜酸乳杆菌活菌数为8.6×10~9 cfu/ml,两个剂量组中双歧杆菌和嗜酸乳杆菌活菌数显著高于其他剂量组(P<0.05),且这两组之间差异不明显(P>0.05)。考虑到经济问题,选择5.5 g/100 g的低聚糖添加量为小鼠试验中的高剂量组。当低聚糖添加量为1 g/100 g时,双歧杆菌和嗜酸乳杆菌活菌数分别达到7.47×10~8 cfu/ml和1.36×10~9 cfu/ml,两种益生菌的活菌数均显著低于其他剂量组(P<0.05),因此选择1 g/100 g的低聚糖添加量为小鼠试验中的低剂量组。(3)婴儿配方奶粉中低聚糖添加量对小鼠肠道菌群、血常规指标及干扰素-?(INF-?)、白细胞介素-2(IL-2)的影响:当奶粉中低聚糖添加量为5.5 g/100 g时,可以显著提高双歧杆菌与乳杆菌活菌数,降低肠杆菌、肠球菌以及产气荚膜梭菌活菌数(P<0.05),并与其他剂量组差异显著(P<0.05)。当奶粉中低聚糖添加剂量为3 g/100 g时,可以显著提高双歧杆菌与乳杆菌的活菌数并仅显著降低肠杆菌及产气荚膜梭菌的活菌数(P<0.05)。当奶粉中低聚糖添加量为1 g/100 g时,对双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌、肠球菌以及产气荚膜梭菌活菌数没有明显的影响(P>0.05)。通过对小鼠血常规指标以及IFN-?和IL-2的检测,得出结果:含有低聚糖的婴儿配方奶粉对小鼠血常规指标没有显著影响(P>0.05),并且当婴儿配方奶粉中低聚糖添加量为5.5 g/100 g时可以显著提高小鼠血清中IFN-?和IL-2的含量(P<0.05)。(4)婴儿配方奶粉中低聚糖添加量对小鼠通便功能的影响:通过对小鼠小肠推进运动、首次排便时间以及排便粒数和重量的测定,得出结果:奶粉中低聚糖添加量为3 g/100 g和5.5 g/100 g时,能够显著增加小鼠墨汁推进率、排便粒数以及重量(P<0.05),并能明显降低小鼠首次排便时间(P<0.05),其中5.5 g/100 g低聚糖添加量的通便作用显著高于3 g/100g低聚糖添加量(P<0.05)。当低聚糖添加量为1 g/100 g时,对小鼠墨汁推进率、排便粒数和重量的增加以及首次排便时间的缩短没有显著的影响(P>0.05)。综合以上试验结果,得出结论:婴儿配方奶粉中不同低聚糖添加量对肠道益生功能有不同的影响,随着低聚糖含量的增高,其对肠道益生功能的影响显著提升,奶粉中低聚糖添加量为5.5 g/100 g时,为本次研究选取的最佳添加量,并以此添加量作为本试验婴儿奶粉配方中的低聚糖含量。(5)对本试验最终确定的婴儿配方奶粉进行感官评分,以制作工艺相同但是不含低聚糖的婴儿配方奶粉作对照,得出结论:在婴儿配方奶粉中,GOS和FOS混合比例为8:2添加量为5.5 g/100g时对婴儿配方奶粉的滋气味、冲调性、组织状态以及色泽没有不利影响。