GLP-1对肥胖大鼠胰岛功能的保护作用及与TLR4信号通路的关系

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目的:探究GLP-1类似物艾塞那肽对肥胖大鼠胰岛功能的保护作用及与TLR4炎症信号通路的关系。方法:1.选用雄性普通SD大鼠及TLR4基因敲除SD大鼠均随机分为普通饲料喂养组和高糖高脂饲料喂养组。饲养16周后,将两种大鼠的高糖高脂组随机分为2个亚组,一组给予GLP-1类似物艾塞那肽皮下注射,另一组予等量生理盐水皮下注射,共干预16周;2.艾塞那肽干预结束后进行葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐量实验(ITT);3.抽取各组大鼠腹主动脉血,检测血清BG、INS、FFA、FetA、IL-1、IL-6、TCHO、TG、LDL水平;4.分离胰腺组织,检测胰腺中TLR4、NF-κB和胰岛素相关基因GPR40、PDX-1的蛋白表达水平;胰腺组织固定、切片后进行HE染色及胰岛α细胞、β细胞免疫荧光双染色,并采用TUNEL法检测胰岛细胞凋亡。结果:1.高糖高脂饲养16周可以建立肥胖胰岛素抵抗大鼠模型。2.GLP-1降低肥胖大鼠FBG、FFA、FetA、IPGTT和ITT的AUC、HOMA-IR、IL-1、IL-6水平,增加INS分泌(P<0.05)。3.GLP-1可以下调肥胖大鼠胰腺TLR4、NF-κB蛋白表达,上调胰岛相关基因GPR40、PDX-1蛋白的表达(P<0.05)。4.GLP-1可减轻HE染色中肥胖大鼠胰腺组织炎症浸润(P<0.05);并可改善胰岛素阳性细胞与胰高血糖素阳性细胞比例,但各组间胰岛细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。5.与野生鼠的高糖高脂组比较,TLR4基因敲除后可改善肥胖大鼠体重、Lee’s指数上升,增加INS分泌,上调胰岛相关基因GPR40、PDX-1蛋白的表达,减轻胰岛炎症浸润,下调NF-κB蛋白表达(P<0.05),增加胰岛β细胞的数量。6.TLR4基因敲除后,GLP-1干预可改善肥胖组大鼠FBG、INS、FetA、HOMA-IR水平(P<0.05),但对体重、Lee’s指数、GPR40与PDX-1的蛋白表达、FFA水平与胰岛炎症浸润、胰腺免疫荧光染色中胰岛的形态与胰岛β细胞的数量等无明显作用(P>0.05),提示敲除TLR4基因后GLP-1干预作用明显减弱。结论:GLP-1可提高肥胖大鼠胰岛素水平,减轻炎症,改善胰岛β细胞的功能,而其发挥作用的机制可能与TLR4炎症信号通路相关。
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