细胞膜钙离子通路Orail的阻滞对实验性小鼠变应性鼻炎的影响

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目的:Orai1是组成钙离子释放激活的钙离子通道(CRAC通道)至关重要的亚单位,对存储调控性钙离子内流(SOCE)起着关键性作用。关于Orai1的研究目前已比较深入,但对于此通路在变应性鼻炎方面的作用目前尚未有研究涉及。本实验意欲检测Orai1在变应性鼻炎小鼠模型中的表达以及评估Orai1通路的阻滞对免疫球蛋白E (IgE)介导的过敏反应的影响。材料和方法:采用BALB/c品系小鼠,通过重复腹腔内注射卵清蛋白致敏、反复鼻腔内滴入卵清蛋白激惹建立变应性鼻炎小鼠模型,然后用免疫组化染色法、蛋白印迹法(western blotting)和实时反转录聚合酶链反应法(real-time RT-PCR)检测Orai1在对照组、实验组和2-氨基乙酯二苯基硼酸(2-APB)干预组小鼠鼻粘膜和鼻相关淋巴组织(NALT)中的表达,另外用酶联免疫吸附实验(ELISA)法分析上述几组小鼠鼻腔灌洗液中的白细胞三烯C4(LTC4)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、卵清蛋白特异性免疫球蛋白E (sIgE)和白细胞介素4(IL-4)的含量,并用real-time RT-PCR法检测几组小鼠鼻粘膜中的白细胞三烯C4合酶(LTC4S)信使核糖核酸(mRNA)、ECP mRNA的含量和小鼠NALT中的胚系Cε转录体、IL-4 mRNA的表达。结果:研究发现Orai1在鼻粘膜上皮细胞、粘膜下腺上皮细胞和NALT的免疫系统细胞中均有表达,在实验组表达尤为显著;2-APB鼻内滴入干预组小鼠相对于实验组小鼠的喷嚏数、挠鼻次数以及鼻粘膜内浸润的嗜酸性粒细胞数都明显减少,而且干预组Orai1在小鼠鼻粘膜和NALT中的表达也明显少于实验组,同时研究还发现,干预组小鼠鼻腔灌洗液中的LTC4、ECP、slgE和IL-4以及这些物质相应的mRNA的含量相对于实验组亦有显著抑制。结论:本实验证实Orai1在小鼠鼻粘膜和NALT中确有表达,2-APB小鼠鼻内滴入的干预措施可以有效地缓解小鼠变应性鼻炎的发作。
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