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本文旨在筛选出具有消除细菌耐药性(或提高抗菌药药效作用)的中药,确定穿黄散组方,研究穿黄散抑菌作用与临床应用效果,为合理用药提供理论依据。1.通过测定常用抗菌药对分离的大肠杆菌MIC值,检测耐药菌产ESBLs情况,结合PCR结果确定产ESBLs的基因型。结果表明,分离菌株均产ESBLs,对头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、阿莫西林等耐药率高达100%,对其他抗菌药也有不同程度的耐药;12株分离株都含有耐药基因,6株含两种耐药基因,3株含三种耐药基因。2.采用中西结合传代方法测定拟被筛选的中药传代后对耐药菌MIC值的影响,筛选出有抑菌作用的中药,并确定穿黄散由穿心莲、黄芩、野菊花组成,进而采用上述方法测定穿黄散传代后对耐药菌MIC值的影响。结果表明穿黄散可增强头孢菌素类、氟喹诺酮类等抗菌药的抑菌作用。3.选取健康10日三黄鸡进行耐药菌株的体内攻毒试验,采用穿黄散水煮液、白龙散水煮液分别治疗。结果表明穿黄散高剂量组、中剂量组对大肠杆菌的治愈率分别为86.7%和83.3%,白龙散的高、中剂量组治愈率仅为70%和56.7%,穿黄散对大肠杆菌的治疗效果优于对照组白龙散。4.穿黄散作用于产ESBLs大肠杆菌后,根据菌体细胞壁超微结构变化、菌液中AKP含量变化、胞外可溶性蛋白含量变化、菌体紫外吸收物的变化以及细菌DNA的影响等五个指标,分析穿黄散的抑菌作用。结果表明,穿黄散可通过增加细菌细胞壁和细胞膜通透性使内容物外渗,抑制细菌蛋白质的合成而达到抑菌作用。5.临床应用效果表明,穿黄散对耐药性大肠杆菌引起的鸡大肠杆菌病具有较好的疗效,平均治愈率91.7%,有效率96.3%。