浸润、转移是恶性肿瘤的基本生物学特征，是导致恶性肿瘤患者死亡的关键因素。肿瘤转移相关基因(metastasis-associated gene1，MTA1)是近年发现的与信号传导及基因调节有关的肿瘤转移相关基因，在多种恶性肿瘤组织中MTA1过表达与肿瘤的浸润转移密切相关。　　基质金属蛋白酶(MMPs)是一个大家族，因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名，是降解细胞外基质的主要酶。MMPs几乎能降解细胞外基质中的各种蛋白成分，破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在肿瘤侵袭转移中起关键作用。　　RECK(reversion inducing cysterne rich protein with Kazal motifs)是一种新发现的转移抑制基因。其机制可能是RECK通过抑制MMP-2、MMP-9及MTI-MMP的分泌活性，从而抑制肿瘤的侵袭和转移。　　材料与方法：　　一、材料　　（一）临床资料　　收集2009年12月至2012年2月中国医科大学附属第一医院门诊及病房乳腺癌胸水患者标本60例（经细胞免疫化学及临床资料证实为乳腺癌细胞），另外20例乳腺液基细胞包埋蜡块，共计80例。　　（二）细胞系　　一种乳腺正常上皮细胞系MCF-10A和两种乳腺癌细胞系(MCF-7为低侵袭低转移癌细胞系，MDA-MB-435s为高侵袭高转移癌细胞系)购自北京协和基地医学院细胞中心。　　（三）主要试剂　　山羊抗人MTA1多克隆抗体购自美国Santa公司，RECK兔抗人单克隆抗体购自美国Santa公司，DAB酶底物显色试剂盒和S-P超敏试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。　　二、方法　　（一）免疫组织化学技术　　采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法行抗MTA1(1∶100)，RECK(1∶100)免疫组织化学染色。切片常规脱蜡至水，高温进行抗原修复，一抗4℃孵育过夜，DAB显色，苏木素复染。用PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性乳腺癌切片做阳性对照。　　（二）Western blot技术　　在三种乳腺癌细胞系中检测MTA1，RECK的蛋白水平。总蛋白从细胞系中提取，冰上超声处理，4℃静置，孵育50min，4℃离心20min(800r/min)，提取上清，放入-70℃冰箱里保存。使用前，用Brodford法测定蛋白浓度，以每孔80μg蛋白加入10％SDS-PAGE凝胶电泳后，4℃，50V(MTA1)、100V(RECK)条件下湿电转移仪将蛋白转入0.22μmPVDF膜，5％脱脂奶粉封闭液封闭2h，一抗(MTA11∶200稀释，RECK1∶200稀释)4℃过夜，X底片曝光，显影，定影后拍照，以β-actin为内参，用凝胶成像及分析系统(BioImaging Systems，美国)分析蛋白各条带的灰度值，每组结果均为相同条件重复3次。　　（三）统计学分析　　应用SPSS16.0统计软件进行数据处理:采用x2检验（不满条件时用Fisher确切概率法）分析各组计数资料，采用Spearman等级相关分析MTA1蛋白与RECK蛋白组化表达的关系，采用t检验分析Western Blot图像灰度值，并用LSD-t检验对各样本均数行两两比较，采用Pearson相关分析两指标Western blot结果的相关性，P＜0.05为差异有统计学意义。　　结果：　　一、MTA1、RECK在乳腺癌组织中的表达　　在60例石蜡标本中，MTA1阳性表达40例(66.66％)定位于细胞核，RECK阳性表达22例(36.66％)主要定位于细胞浆，统计学分析显示，MTA1蛋白表达与RECK蛋白表达呈负相关，二者的表达与乳腺癌肿块大小，组织学分级，临床分期，淋巴结转移有关。　　二、MTA1、RECK在乳腺癌细胞系中的表达　　Western blot检测，乳腺正常上皮细胞系MCF-10A和乳腺癌细胞系MCF-7，MDA-MB-435s中MTA1蛋白表达水平呈递增趋势，而RECK蛋白表达水平则呈递减趋势。　　结论：　　MTA1的表达与乳腺癌的浸润转移程度正相关，RECK的表达呈负相关趋势。　　MTA1的高表达、RECK的低表达与乳腺癌肿块大小，组织学分级，临床分期，淋巴结转移有关。