基于喷墨打印技术的生物DVD光盘的制备与检测

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微阵列技术作为一种强大的生物检测与分析方法,近年来得到了广泛的关注和研究,但是由于生物芯片点样仪和激光荧光扫描仪价格昂贵,致使微阵列技术的应用仍局限于大型医院和专业的生物实验室,而无法得到广泛推广。研发低成本、易操作的生物分子快速、定量分析方法对于提高公共健康质量,尤其是疾病的早期和在线诊断(point-of-care, POC)具有非常重要的意义。随着喷墨打印机的广泛应用,以及计算机光驱/光盘的全面普及,利用喷墨打印技术在光盘塑料基底上制备多通道微阵列,同时结合光驱/光盘的分子检测技术,有望成为新一代具有应用前景的医疗诊断工具。本文主要研究了利用喷墨打印机制备生物检测DVD光盘,并且利用普通光驱信号识别方法进行了定量检测。值得一提的是,研究中所使用的仪器均为大量普及的商用产品,因此该方法最大的优势就是检测成本低、操作简单、易于推广。本论文主要完成以下工作:1.成功地将DVD光盘表面聚碳酸酯材料由疏水性改变为亲水性。经过紫外臭氧处理后,水在其表面的接触角从88.07。减小到9.33。。2.实验制备了PDMS微流体通道,利用它在光盘表面限制生物素-链酶亲和素免疫反应区域,最后通过银染使检测区域内的探测信号放大。利用光盘纠错分析软件将制备好的DVD生物光盘进行扫描和数据读取,通过分析单位面积内的错误数和光学灰度值,进行定量检测。与CD生物检测光盘相比,DVD生物检测光盘具有更高的灵敏度。3.对未经改造的商用压电式喷墨打印机进行了色彩管理测试和墨水扩散分析,并且利用喷“墨”打印方法在DVD光盘表面制备不同浓度的多通道生物素-链酶亲和素免疫微阵列结构。研究表明,通过这种制备方法对链酶亲和素的检测灵敏度为0.6μg/mL,检测范围在0.6-1.2μg/mL。实验也表明打印墨盒所需试剂最小容量为500μL,最佳打印次数为5次。
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