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目的:创伤后肌腱粘连发生率高,导致运动功能障碍,临床治疗尚缺乏有效靶点。巨噬细胞是组织粘连的调控者,可通过细胞间“通讯”的方式改变靶细胞的功能和表型,而由外泌体(Exosome)介导的microRNAs传递在细胞间“通讯”以及疾病发生发展中具有重要作用。本研究从Exosome介导的细胞间“通讯”的角度出发,探索巨噬细胞来源的Exosomal-microRNA在肌腱粘连形成中的作用及分子机制,为创伤后肌腱粘连的防治提供新的理论依据和分子靶标。方法:首先,对比野生型小鼠和巨噬细胞缺失小鼠(药物构建)中趾深屈肌腱术后的粘连程度(从大体观、生物力学、组织学及蛋白表达评估),阐明巨噬细胞在肌腱粘连形成中的作用;然后,体外提取骨髓来源的巨噬细胞的外泌体,回输巨噬细胞缺失小鼠体内,阐明巨噬细胞来源的外泌体在肌腱粘连形成中的作用;随后,体外实验进一步证明巨噬细胞来源外泌体对成纤维和肌腱细胞功能的影响;之后,利用二代测序技术确定巨噬细胞来源外泌体内microRNAs含量,并利用体外转染实验验证含量最高的microRNA-21-5p对成纤维和肌腱细胞功能的影响;最后,利用生物信息学分析预测microRNA-21-5p的下游靶基因,利用体外细胞转染实验验证靶基因的有效性。结果:大体观、组织学及蛋白表达评估显示,相比野生型小鼠,巨噬细胞缺失小鼠的腱周粘连显著减轻;然而,将巨噬细胞来源外泌体静脉回输到巨噬细胞缺失小鼠后,外泌体明显聚集于手术侧的趾屈肌腱,并且引起了肌腱粘连的再发生;体外实验表明巨噬细胞来源外泌体可显著促进成纤维和肌腱细胞的增殖、迁移,以及细胞外基质的过度分泌;二代测序结果显示外泌体中的microRNA-21-5p含量最高,体外转染实验表明microRNA-21-5p显著提高了成纤维和肌腱细胞的增殖、迁移以及细胞外基质的分泌;之后,体外转染实验结果证明了microRNA-21-5p是通过下调其下游靶基因SMAD7的表达,从而提高了成纤维和肌腱细胞增殖、迁移以及细胞外基质分泌的能力。结论:巨噬细胞通过外泌体介导的细胞间“通讯”的方式,将外泌体内的microRNA-21-5p转运到了受损肌腱组织处,通过下调组织内成纤维细胞和肌腱细胞中SMAD7的表达而促进细胞的增殖、迁移以及细胞外基质的沉淀,介导创伤后肌腱粘连的形成。