小白菜硫代葡萄糖苷含量及芳香族硫苷合成相关基因CYP79A2的克隆

来源 :浙江大学农业与生物技术学院 浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Hawk8
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硫代葡萄糖苷是一种广泛存在于十字花科植物中的重要含氮、硫次生代谢物。由于其在黑芥子酶作用下的降解产物异硫代氰酸盐有生物防御、抗菌及抗癌等作用,日益受到人们的重视。   本论文研究了小白菜杭州油冬儿在不同生长期不同部位的硫苷含量变化,以及7个品种小白菜地上部和根系的硫苷含量,并且成功克隆到在芳香族硫苷合成过程中的关键基因CYP79A2。   在小白菜中共检测到7种硫苷,分别是5-甲基亚磺酰戊基硫苷、3-丁烯基硫苷、4-戊烯基硫苷、吲哚-3-甲基硫苷、2-苯乙基硫苷、4-甲氧基吲哚-3-甲基硫苷、1-甲氧基吲哚-3-甲基硫苷。实验发现不同生长期的硫苷含量存在差异,硫苷含量一般随着生长时间先升高后降低,因此为获得高硫苷含量的小白菜需适时收获。叶片和叶柄的硫苷含量和种类较为相似,在叶片和叶柄都中含有大量的脂肪族硫苷,在根部芳香族硫苷占绝对多数。不同品种小白菜硫苷含量存在差异,但在各品种中地上部的脂肪族硫苷含量都高于根部,吲哚族和脂肪族则是根部高于地上部,可以通过品种选育的方法来获得高含量目标硫苷的品种。   根据拟南芥和大白菜CYP79A2基因的序列设计特异性引物,从小白菜品种杭州油冬儿中提取到的RNA克隆到小白菜CYP79A2的cDNA序列,其编码区为1572 bp,推导的蛋白质有523个氨基酸,分子量为59.33 kDa,目前在Genebank只找到拟南芥和大白菜存在同源基因,与本实验克隆到的基因相比,相似性分别为85.42%和96.98%。CYP79A2在硫苷合成过程中将芳香族氨基酸转化成乙醛肟,因此在芳香族硫苷合成过程中起着关键作用,此基因的克隆为将来利用基因工程手段提高芳香族硫苷提供了可能。
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