前期研究发现,血浆内源性视黄酸含量在蛋鸭处于上笼应激高峰期显著降低,视黄酸可能对蛋鸭上笼应激损伤修复具有重要作用。本试验旨在探讨维生素A及其衍生物视黄酸对H2O2诱导的鸭小肠上皮细胞（IEC）氧化应激损伤后的作用研究。具体包括前期研究基础（试验一）和试验二两个部分:试验一:蛋鸭笼养可解决传统养殖存在的环境污染问题。但是,鸭是水禽,在被“赶上架”后,会出现上笼应激导致肠黏膜损伤。试验旨在分析在上笼不同阶段对蛋鸭生产性能以及血浆代谢物综合变化的影响,为后续研究提供参考。记录各组采食量和产蛋数。在试验第1天,每隔5天（第5、10、15天）测定蛋鸭体重。测定血浆氧化应激指标。采用液相色谱-质谱联用技术（LC-MS/MS）测定传统饲养（TB）和上笼5（CR5）、10（CR10）和15（CR15）天血浆中代谢物的变化,KEGG分析差异代谢产物的相关通路。结果表明,与其他各组相比,CR10组的采食量下降、体重降低、血浆总超氧化物歧化酶（T-SOD）水平升高。此外,检测到1431个代谢物。与TB组相比,CR5、CR10和CR15组分别鉴定出134、381和190个差异产生代谢物。主成分分析（PCA）结果表明,所选成分能够充分区分TB和CR10组。KEGG分析结果显示,CR5和TB组蛋鸭血浆中代谢产物的差异主要与卵巢甾体生成、不饱和脂肪酸生物合成和苯丙氨酸代谢有关。CR10和TB组蛋鸭血浆代谢物差异主要与磷酸转移酶系统（抗坏血酸）、醛固酮合成和分泌（花生四烯酸和皮质酮）、维生素消化吸收（维生素B2、抗坏血酸和视黄酸）、以及类固醇激素的生物合成（孕酮、皮质醇和皮质酮）有关。此外,CR15和TB组相比,蛋鸭血浆中差异代谢物主要与卵巢甾体生成（花生四烯酸、孕酮）、花生四烯酸代谢（白三烯B4、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸）、脂肪细胞脂解调节（花生四烯酸、皮质酮）有关。综上所述,通过比较蛋鸭生产性能、氧化应激指标、差异代谢物数量和主成分分析（PCA）,探讨上笼不同阶段对蛋鸭生产性能的影响。从试验结果可以推断,蛋鸭在上笼后的前5天处于敏感阶段,上笼约10天是一个应激高峰,随后蛋鸭不断适应笼养环境。血浆内源性视黄酸（RA）含量在蛋鸭处于上笼应激高峰期显著降低,表明RA可能对蛋鸭应激损伤修复具有重要作用。试验二:蛋鸭处于上笼应激高峰期血浆内源性视黄酸（RA）含量显著降低,肠屏障受损。维生素A（VA）是一种必需的脂溶性维生素,有助于IEC的正常代谢、抵抗感染和增强免疫力。RA是VA的衍生物,发挥其主要的生理功能。在体内,VA、RA受到氧化应激影响,VA可以转化为RA,呈现动态变化。我们通过添加不同浓度VA/RA模拟这一过程,验证RA是否在肠道应激损伤修复中发挥重要作用。试验分为5组:空白对照组（CG1）、阳性对照组（CG2）、高浓度RA组（TG1）(VA:RA=1×10-8 M:3×10-8 M)、中浓度RA组（TG2）(VA:RA=2×10-8 M:2×10-8 M)和低浓度RA组（TG3）(VA:RA=3×10-8 M:1×10-8 M)。空白对照组不进行任何处理,阳性对照组和试验组均用50μM H2O2处理细胞4 h诱导氧化应激。每组设3个重复。采用RNA-Seq筛选差异表达基因,进行KEGG通路富集和GO分析,并通过RT-q PCR验证。通过CCK-8测定法测量细胞活力,细胞跨膜电阻（TEER）测量肠屏障完整性和紧密连接通透性。RNA-Seq分析表明,添加VA/RA改变了参与细胞粘附分子（CAMs）、PPAR信号通路的基因表达。与CG1相比,50μM H2O2处理显著降低了细胞活力。与CG2相比,TGs的细胞活力和TEER显著提高（P<0.05）。随着RA浓度的增加,Nrf2和HO-1的相对表达增加（P<0.05）。TGs的ZO-1、Claudin-1和Occludin的基因表达水平高于CG2（P<0.05）。高浓度RA(VA:RA=1×10-8 M:3×10-8 M)在m RNA水平上增强紧密连接蛋白标记物ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达,增强细胞活力,降低肠通透性,缓解H2O2诱导的肠上皮屏障功能障碍。