桑椹病原真菌的鉴定和采后微生物保鲜的研究

来源 :江苏科技大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:jinr0op2
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桑椹属于浆果类,生物活性物质含量丰富,营养价值高,被誉为“21世纪最佳的保健果品”之一。采前桑椹菌核病和采后果实腐生性病害是导致桑椹产量损失的重要原因。本文主要对桑椹采前和采后病原真菌的分离鉴定,生防微生物对采后致腐菌的拮抗抑制作用和生防微生物采后处理对桑椹品质的影响等三个方面进行了研究。主要研究结果如下:(1)从发病菌核培养出的子实体鉴定出桑椹菌核病致病菌的种类。将从桑园采集的桑椹菌核病菌核在土壤中培养产生三种不同形状的子实体,将不同形状的子实体分离体通过真菌ITS1/ITS4引物扩增测序,结果经NCBI数据库BLAST比对同源性分析,三种子实体与桑实杯盘菌(Ciboria shiraiana),核地杖菌(Scleromitrula shiraiana)和肉阜状杯盘菌(Ciboria carunculoides strain)相似度分别为99%、97%和98%。(2)分离获得三株桑椹致腐性真菌。从采后腐烂桑椹上分离真菌,经科赫法则反接验证后,通过显微形态和真菌ITS测序BLAST同源比对分析,获得三株桑椹致腐真菌,分别是葡萄孢属(Botrytis spp)霉菌,匐枝根霉(Rhizopus stolonifer spp.)菌和毛霉属(Mucor spp.)霉菌。(3)TR16、TR66和BS对桑椹致腐菌具有拮抗活性。通过平板对峙和发酵滤液抑菌实验,从定殖能力、重寄生能力及对三株致腐菌的生长抑制率等进行生防微生物对致腐菌拮抗活性的分析,并以1%壳聚糖(CTS)与TR16,TR66发酵滤液的抑菌活性进行对比,结果表明TR16和TR66比桑椹致腐菌空间营养竞争能力强,空间定殖能力≧50%,对峙培养对致腐菌菌丝生长抑制率为60%-80%。BS对葡萄孢属霉菌对峙培养的菌丝生长抑制率为58.08%。1%CTS与空白对照相对三株致腐菌的RF1,RF2,RF3的平均菌丝生长抑制率分别为30.12%,24.53%和18.75%,TR66发酵滤液对三株致腐菌的抑制效果最强,显著高于1%壳聚糖(CTS)处理(P<0.05)。TR16发酵滤液对菌株RF2的抑制效果显著性优于CTS处理,对RF1和RF3的抑制作用与1%CTS无显著差异。(4)TR16,TR66和BS的发酵滤液和孢子悬液采后处理对桑椹品质的影响。以常用的果蔬保鲜剂1%CTS作对照,蒸馏水处理作为空白处理,结果表明壳聚糖处理桑椹后显著性抑制采后水果腐烂率、失重率、可溶性固形物和抗坏血酸含量的损失,花青素,黄酮,总酚抗氧化物质的含量和抗氧化活性比对照组显著性的提高。不同形式的TR66和BS处理显著性的抑制了采后果实的腐烂率,失重率,可溶性固形物质含量和抗坏血酸的降低。在储藏的过程中,生物活性物质花青素、黄酮和总酚的含量变化,呈现先升高后降低的趋势。CTS,TR16,TR66和BS处理后花青素的含量比空白对照组显著性提高,三株生防微生物发酵液采后处理使桑椹中黄酮和总酚物质含量比对照组显著性的提高。在储藏21d时,TR66发酵滤液处理桑椹果实品质最好。本研究对首先对影响桑椹品质的两种病害的致病性真菌进行培养鉴定;其次通过生防微生物对采后桑椹致腐菌的拮抗作用和采后桑椹品质的影响,对其应用于桑椹保鲜的可行性进行了初步的研究,旨在为桑椹病害的控制和其采后的微生物保鲜技术提供理论和实践依据。
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