论文部分内容阅读
研究背景:肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一,肾癌早期临床表现较为隐匿,25%-57%的患者确诊时已有远处转,约20%-30%局部性肾癌患者术后仍将发展为转移癌。肾癌具有多重耐药基因,国内外大量研究表明肾癌对传统放、化疗均不敏感,5年生存率不足15%,中位生存期(OS)仅10.2个月。肾癌是一种免疫原性极强的肿瘤,生物治疗一直以来均为一线治疗方案中的可选治疗方法,早期的细胞因子治疗,包括高剂量IL-2和干扰素-α均显示出一定疗效,但剂量毒性难以控制使其临床应用受到限制。随着分子靶向药物的研究发展,包括索拉非尼、舒尼替尼等多种小分子TKI靶向药物被用来治疗转移性肾癌。近年国内外的临床试验结果显示,索拉非尼治疗转移性肾癌客观有效率24%,中位OS为29.3个月;舒尼替尼一线治疗转移性肾细胞癌客观有效率31.1%,疾病控制率76.7%,中位OS为30.7个月。但分子靶向药物副作用及耐药问题仍亟待解决。基于以上原因,转移性肾癌的治疗具有挑战性,因此寻找更新更有效的治疗途径成为治疗转移性肾癌的研究重点。细胞免疫治疗是近年发展起来的,以安全性高,可有效清除微小残留肿瘤病灶等为主要特点,其作用原理是经过增强身体的免疫功能,改善机体的免疫抑制状态,提高患者的抗肿瘤免疫反应,从而杀灭肿瘤细胞,控制肿瘤细胞的生长,且不损伤正常细胞。细胞免疫治疗是继外科手术、化疗、放疗之后的新的抗肿瘤治疗模式,已成为转移性肾癌治疗领域的焦点。近年我院利用DC-CIK细胞治疗肾癌取得较好临床疗效。研究目的:本研究旨在评价自体树突状细胞(dentritic cell,DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)治疗转移性肾癌的临床疗效、免疫功能变化及随访观察。探讨DC-CIK细胞免疫治疗转移性肾癌的临床应用价值,及其作用机制的初步研究。为转移性肾癌患者的治疗提供新的思路,并为DC-CIK治疗转移性肾癌的安全应用提供临床数据。研究方法:观察2011年1月至2013年5月我院收治的27例可评估的转移性肾癌患者,其中男23例、女4例,年龄32–81岁,中位年龄57岁;KPS评分70-90分。所有患者均经标准方案治疗后,病理类型均为肾透明细胞癌,并连续接受治疗2疗程以上,治疗后定期复查。采集患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经实验室的体外培养诱导产生DC和CIK细胞。经无菌检测、流式细胞术表型鉴定及细胞计数后回输给患者。采集PBMC后第7、9、11、13天予患者皮下注射(3-10)×107个DC(1ml),第11、13天静脉回输(2-15)×109个CIK细胞(100ml),每疗程间隔3个月,直至疾病进展,观察临床疗效及不良反应,转移部位及免疫治疗疗程与临床疗效的关系。主要观察指标为客观缓解率(objective response rate,ORR),疾病控制率(disease control rate,DCR),及2年总生存(overall survival,OS)率。次要观察指标为不良反应发生率及影响患者疗效的因素。分别于免疫治疗前1周和每疗程完成后的1个月取患者外周血,流式细胞术检测淋巴细胞亚群结果,包括CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD19-、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD3+CD16+CD56+、CD3+HLA-DR-、CD3+HLA-DR+、CD3+CD28+CD8+、CD3+CD4+CD25+、Th1及Th2的动态变化。比较治疗前后各淋巴细胞亚群水平的变化,初步探讨细胞免疫治疗的作用机制。使用SPSS19.0软件统计分析全部数据,对患者接受细胞免疫治疗前后淋巴细胞亚群不同时间点的变化采用方差分析,P<0.05表示差异有统计学意义研究结果:27例转移性肾癌患者经DC-CIK治疗后1例CR(3.7%),9例PR(33.3%),13例SD(48.2%),4例PD(14.8%);客观反应率为37%,疾病控制率为85%,2年总生存率为81.5%。细胞免疫治疗后患者外周血的Th1细胞有升高趋势(P<0.05),多次治疗后CD3+CD4+CD25+T细胞(Treg细胞)有降低趋势(P<0.05),CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD19-、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD3+CD16+CD56+、CD3+HLA-DR-、CD3+HLA-DR+、CD3+CD28+CD8+细胞亚群及Th2治疗后与治疗前相比无显著变化(P>0.05)。治疗过程中27例患者均未出现明显不良反应。结论:1.DC-CIK细胞免疫治疗转移性肾癌安全有效。2.DC-CIK细胞免疫治疗后免疫功能中CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD19-、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD3+CD16+CD56+、CD3+HLA-DR-、CD3+HLA-DR+、CD3+CD28+CD8+细胞亚群及Th2与治疗前相比无显著变化,多次DC-CIK细胞免疫治疗后Treg细胞比例下降,Th1细胞比例上升。DC-CIK细胞免疫治疗对Treg细胞具有抑制作用,可改善转移性肾癌患者的免疫抑制状态,提高患者的抗肿瘤免疫反应。