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目的:探讨孕酮对不明原因复发性自然流产(URSA)患者淋巴细胞产生IL-4、IL-12因子的调节,及这种调节作用与PPARγ的相关性,进而探讨孕酮对Th1/Th2平衡的调节及可能机制。
方法:抽取URSA患者肘静脉血,密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMC),以1.0×106个/ml的浓度悬浮在含10[%]小牛血清的RPMI-1640 培养基中,实验分为孕酮组和对照组,孕酮组加入孕酮和植物血凝素(PHA)终浓度分别为10-5mol/L、5ug/ml,对照组加同浓度的PHA和同体积溶解孕酮的溶剂,于37℃、5[%]CO2细胞培养箱内培养72小时后,采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-12、IL-4的浓度,细胞提取全蛋白,用Western Blotting法检测过氧化物酶体增值物激活受体γ(PPARγ)的表达。
结果:ELISA检测显示孕酮组IL-12 水平显著低于对照组(90.240±14.582 VS132.206±15.562 P<0.01),IL-4 显著高于对照组(10.404±1.015VS 9.776±0.870 P<0.01)。
Western 结果示孕酮组PPARγ的表达显著强于对照组(P<0.01)。分别对IL-12、IL-4 与PPARγ做相关性分析,发现二者均与PPARγ显著相关。
结论:孕酮能抑制URSA 妇女的PBMC 产生IL-12,促进产生IL-4,从而调节Th1/Th2因子平衡,孕酮能诱导PPARγ的表达,可能通过PPARγ调节IL-12,IL-4的表达,PPARγ是重要的免疫调节因子。