毕赤酵母泥抽提工艺优化研究

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毕赤酵母表达系统是应用非常广泛的外源基因表达系统,因此可以利用毕赤酵母进行多种酶的工业化生产。在生产酶的过程中,会产生大量的毕赤酵母菌体,大约占发酵总体积的30%-40%。毕赤酵母的细胞壁很厚,不能被动物所消化,因此不能直接用作动物饲料。很多工厂直接把它们排入环境,这不仅浪费了资源,还污染了环境。毕赤酵母细胞中蛋白含量非常高,利用毕赤酵母泥生产酵母抽提物并用于微生物培养基原料,是一项变废为宝、实现资源循环利用的有效途径。本文对毕赤酵母泥生产酵母抽提物的工艺条件进行了研究,结果如下:(1)建立测定酵母抽提物浓度的方法—折光仪法(2)单因素以及多因素正交实验优化。影响酵母抽提物得率的因素有抽提温度、pH、抽提时间、自溶促进剂氯化钠浓度、酵母悬浮液浓度、酵母破壁酶和抽提酶种类及用量等。单因素以及多因素正交优化实验结果表明,其最佳的抽提条件:毕赤酵母泥和无菌水的质量比为1:2,氯化钠浓度3%,温度55℃,pH值5.5,酵母破壁酶和抽提酶0.8%,酵母抽提酶和酵母破壁酶的质量比为1:2,抽提时间8h。本文对酵母抽提的工艺进行了研究,通过外加酶来改善毕赤酵母的抽提效果。发现酵母破壁酶和抽提酶共同添加时,比添加同质量的单一酶有更好的抽提效果。本实验采用自溶—酶联合法对毕赤酵母泥进行抽提。对毕赤酵母泥的抽提条件进行了研究,并结合实际生产,确定了其最佳的抽提条件。在此条件下,在水浴恒温振荡器中150rmp抽提,酵母抽提物的得率可达35.76%。(3)中试试验。本实验通过中试试验来验证毕赤酵母泥的最佳抽提条件,在50L发酵罐中,在其最佳抽提条件下,150rmp抽提8h,酵母抽提物的得率可达37.58%,其总氮含量可达酵母抽提物干重的11.36%,达到国家食品级优级水准。
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