小干扰RNA技术下调Cofilin表达对肺癌细胞迁移侵袭和微丝骨架的影响

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目的 探讨肺癌细胞内Cofilin蛋白的表达与肺癌细胞迁移、侵袭及微丝骨架系统的关系,同时分析人肺癌组织中Cofilin蛋白表达与肺癌临床病理参数和转移的关系,为临床判断肺癌患者转移、预后及靶向治疗提供一定的理论依据。方法 采用Western blot法,检测肺癌细胞系高转移性肺癌细胞(95D、801D、PG细胞),低转移性肺癌细胞(95C细胞)、肺腺癌细胞(A549细胞)和支气管肺上皮细胞(BEAS-2B细胞)中Cofilin蛋白的表达水平。同时采用免疫组织化学SP法,检测100例非小细胞肺癌(NSCLC)组织和30例癌旁肺组织中Cofilin蛋白的表达。通过shRNA(Cofilin)细胞转染、划痕实验、Transwell小室实验和荧光显微镜等方法检测Cofilin基因下调后肺癌细胞生物学行为的改变。结果 1.801D细胞、95D细胞和PG细胞的Cofilin蛋白表达水平明显高于95C细胞、A549细胞和BEAS-2B细胞,这种差异性表达提示Cofilin与肺癌的转移相关。2.肺癌组织中Cofilin蛋白的表达水平明显高于癌旁组织,进一步研究发现:Cofilin的表达与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织类型、临床分期以及病理分级无关(均P>0.05),但与淋巴结转移有显著的差异(χ2=10.256,P<0.01)。3.下调Cofilin基因表达可明显抑制肺癌细胞的迁移和侵袭能力,并影响肺癌细胞微丝骨架的重排。结论 Cofilin在肺癌细胞的侵袭和转移中发挥十分重要的作用,检测Cofilin的表达水平可作为判断肺癌患者转移和预后的指标,同时也为临床进行肿瘤靶向治疗提供一定的理论依据。
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