【摘 要】
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目的:探究调控TGF-β_1/Smad4通路对宫颈癌SiHa细胞自噬基因LC3、p62的影响方法:取浓度为1.5×105/ml处于对数生长期的宫颈癌SiHa细胞接种于六孔板中,常规培养24h后贴壁,饥饿处理过夜。分组处理如下:A组为加入0 ng/ml的TGF-β_1组(空白对照),B组为加入5 ng/ml的TGF-β_1组,C组为加入10 ng/ml的TGF-β_1组,D组为加入0 ng/ml的S
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目的:探究调控TGF-β1/Smad4通路对宫颈癌SiHa细胞自噬基因LC3、p62的影响方法:取浓度为1.5×105/ml处于对数生长期的宫颈癌SiHa细胞接种于六孔板中,常规培养24h后贴壁,饥饿处理过夜。分组处理如下:A组为加入0 ng/ml的TGF-β1组(空白对照),B组为加入5 ng/ml的TGF-β1组,C组为加入10 ng/ml的TGF-β1组,D组为加入0 ng/ml的SIS3组(空白对照),E组为加入5 ng/ml的SIS3组,F组为加入10 ng/ml的SIS3组,以上各组均为24小时后收取细胞。采用实时荧光定量PCR法及免疫印迹法检测自噬基因LC3、p62在mRNA水平及蛋白水平上的表达量变化。结果:1.不同浓度的TGF-β1作用SiHa细胞24小时后,随TGF-β1浓度升高,LC3 mRNA及蛋白的表达量逐渐增高(P<0.05);p62 mRNA及蛋白的表达量逐渐降低(P<0.05)。2.不同浓度的SIS3作用SiHa细胞24小时后,随SIS3浓度升高,LC3 mRNA及蛋白的表达量逐渐降低(P<0.05);p62 mRNA及蛋白的表达量逐渐增高(P<0.05)。结论:1.外源性的TGF-β1/Smad4通路激活剂TGF-β1可使宫颈癌SiHa细胞自噬蛋白LC3 mRNA和蛋白表达量升高,p62 mRNA及蛋白的表达量降低,诱导宫颈癌SiHa细胞发生自噬;2.外源性的TGF-β1/Smad4通路抑制剂SIS3可使宫颈癌SiHa细胞自噬蛋白LC3mRNA和蛋白表达量降低,p62 mRNA及蛋白的表达量升高,抑制宫颈癌SiHa细胞发生自噬;3.随TGF-β1和SIS3浓度的增加,LC3、p62表达量出现变化,具有一定的浓度依赖性。
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