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目的:探讨PRL-3是否通过其磷酸酶活性调控PTEN的表达,并进一步通过调控PI3K/Akt信号通路促胃癌腹膜转移。方法:(1)取49例无腹膜转移的胃癌组织、23例有腹膜转移的胃癌组织、21例正常胃黏膜组织,用Western blot方法检测PRL-3蛋白、PTEN蛋白、p-PTEN蛋白的表达变化,用磷酸酶检测试剂盒检测PRL-3磷酸酶活性。(2)对培养的1株正常胃黏膜细胞株GES-1和5株转移潜能不同的胃癌细胞株(SGC7901,MKN28,MKN45,AGS和MGC803),用上述办法检测(1)中的相应指标。(3)构建野生型PRL-3表达质粒EGFP-PRL-3和突变型PRL-3表达质粒EGFP-PRL-3(D72A/C104S),转染SGC7901细胞株,用上述办法检测(1)中的相应指标,用Transell实验检测细胞侵袭、转移能力变化。(4)构建PRL-3高表达质粒EGFP-PRL-3和PRL-3低表达质粒PRL-3-RNAi,转染SGC7901细胞株,用上诉办法检测(1)中的相应指标,同时用Western blot方法检测Akt蛋白、p-Akt蛋白及MMP-2、MMP-9蛋白表达变化,用Transell实验检测细胞侵袭、转移能力变化。(5)构建PTEN低表达质粒PTEN siRNA,并转染PRL-3低表达SGC7901/PRL-3-RNAi细胞株,相同办法检测(4)中的指标。结果:(1)组织中的蛋白表达水平:PRL-3在有腹膜转移的胃癌组织较正常胃黏膜组织高表达;有腹膜转移的胃癌组织PRL-3磷酸酶活性高于无腹膜转移的胃癌组织;PTEN表达水平:有腹膜转移胃癌组织<无腹膜转移的胃癌组织<正常胃黏膜组织;p-PTEN/PTEN:有腹膜转移的胃癌组织>无腹膜转移的胃癌组织>正常胃黏膜组织。(2)细胞株中的蛋白水平变化:PRL-3在胃癌细胞株中表达水平高于正常胃黏膜细胞株,SGC7901细胞株中表达最高;PRL-3磷酸酶活性在胃癌细胞株中表达水平高于正常胃黏膜细胞株,SGC7901细胞株中活性最高;胃癌细胞株中PTEN表达水平低于正常胃黏膜细胞株;胃癌细胞株p-PTEN/PTEN比率高于正常胃黏膜细胞株。(3)在有酶活性和无酶活性的PRL-3细胞株中,两组PRL-3磷酸酶活性:野生型>突变型;PTEN表达量:野生型<突变型,p-PTEN/PTEN磷酸化比率:野生型>突变型;不同细胞株侵袭、转移能力:野生型>突变型。(4)在PRL-3高表达及低表达细胞株中,PRL-3磷酸酶活性:PRL-3高表达细胞株>PRL-3低表达细胞株。PRL-3高表达细胞株中,p-Akt/Akt比率升高,Akt被磷酸化激活,MMP-2、MMP-9表达量升高;PRL-3低表达细胞株中则与此相反。当我们往PRL-3高表达细胞株中加入MMP-2/MMP-9抑制剂I后,胃癌细胞侵袭、转移能力下降。(5)在PRL-3低表达细胞株中加入PTEN si RNA后,PTEN表达下调,p-Akt/Akt上调,MMP-2、MMP-9表达上调,细胞侵袭、转移能力得到部分恢复。结论:PRL-3通过其磷酸酶活性下调PTEN,激活PI3K/Akt信号通路,上调MMP-2、MMP-9,促进胃癌腹膜转移。