[目的]观察单层培养的大鼠髁突软骨细胞连续传代中表型的变化,研究TGF-β2作用后Ⅱ型胶原、聚集蛋白多糖表达的变化,对细胞表型的维持作用。探讨TGF-β2对于去分化软骨细胞的活化作用,为髁突生长发育及软骨细胞源性组织工程研究提供依据。[方法]选用新生SD大鼠的髁突软骨作为原代培养的组织来源,建立髁突软骨细胞有限细胞系。髁突软骨细胞连续传代培养,通过观察细胞形态,Ⅱ型胶原的免疫组化染色,实时荧光定量PCR(real time quantitative polymerase chain reaction, RT-PCR)方法检测软骨细胞外基质中Ⅱ型胶原和聚集蛋白多糖mRNA的表达,观察单层培养的大鼠髁突软骨细胞连续传代细胞表型的变化；在相同培养条件下,加入80ng/ml TGF-β2,以相同方法研究TGF-β2对髁突软骨细胞表型的维持和对于去分化软骨细胞的活化作用。[结果]髁突软骨细胞表型随着细胞传代逐渐降低,软骨细胞逐渐由多角形变为长梭形,至第五代时软骨细胞表型基本完全丧失。第三至五代加入80ng/ml TGF-β2组体外培养的髁突软骨细胞Ⅱ型胶原及聚集蛋白多糖的表达较对照组增强。TGF-β2对于一、二代细胞Ⅱ型胶原及聚集蛋白多糖的表达增强不明显。对于第三代开始去分化的软骨细胞,TGF-β2有较强的活化作用。[结论]髁突软骨在连续传代培养中,细胞表型逐渐丧失；传代至第三代时细胞表型开始丧失,至第五代时细胞表型基本完全丧失。一定浓度的TGF-β2对髁突软骨细胞的Ⅱ型胶原和聚集蛋白多糖合成具有维持作用,特别是对三、四、五代软骨细胞作用明显；同时对开始去分化的髁突软骨细胞TGF-β2也有一定的活化作用,但活化作用相对有限。