论文部分内容阅读
桃蚜(M.persicae)是农业生产中的一种重要害虫,可以传播多种植物病毒病,影响作物的产量和品质,而长期的化学农药防治带来了严重的“三R”问题。植物源农药和虫生真菌类杀虫剂以其安全性高,不易产生抗药性等优点越来越受到青睐。本研究以八角茴香果实的有机溶剂提取物和几种绿僵菌单独处理及分别混用对桃蚜进行生物活性测定,并研究了混合处理与绿僵菌单独处理后对桃蚜体内过氧化氢酶(CAT)活性的影响,为研究八角茴香提取物对绿僵菌是否存在增效作用提供理论和实验依据。研究取得如下主要结果:1八角茴香干果的有机溶剂浸提用乙醇、石油醚和乙酸乙酯3种有机溶剂对八角茴香干果在35℃下进行热提取,提取率分别为20.10%、11.61%和16.67%。2八角茴香提取物和绿僵菌单独处理对桃蚜的生物活性2.1八角茴香提取物对桃蚜的触杀作用设计了0.04、0.20、1.00和5.00 mg/m L4个浓度梯度,采用喷雾法测定了八角茴香3种提取物对桃蚜的触杀效果。结果表明3种提取物均对桃蚜有较强的触杀效果。乙醇、石油醚、乙酸乙酯提取物使用喷雾法处理桃蚜后,LC50分别为0.3809、0.1854和0.2660 mg/m L,处理7d后,最高浓度5.00 mg/m L下对桃蚜的校正死亡率分别为88.89%、98.29%和95.73%;最低浓度0.04 mg/m L下的校正死亡率分别为13.16%、21.37%和16.24%,表明在此浓度下,几种溶剂的八角茴香提取物对桃蚜的触杀活性极低。2.2绿僵菌对桃蚜的毒力分别将黄绿绿僵菌Mf82、Mf04菌株和金龟子绿僵菌Ma60、Ma40菌株,配制成浓度为1×108,1×107,1×106个孢子/m L的悬浮液,对桃蚜进行喷雾法处理。结果表明:4种菌株均对桃蚜有较强的毒力。1×108个孢子/m L浓度下对桃蚜的校正死亡率分别为90.35%、65.83%、78.95%和83.33%,4种菌株对桃蚜的活性大小为Mf82>Ma40>Ma60>Mf04,且4种菌液对桃蚜的触杀效果均随着浓度的升高而增强。3八角茴香提取物和绿僵菌混用对桃蚜的生物活性3.1适宜浓度的八角茴香提取物和黄绿绿僵菌混配对桃蚜的毒力采用喷雾法,混用增效所选混剂在单剂死亡率介于30%~70%的浓度下将两单剂混合,混合后的浓度保持与它们单用时相同的水平。本实验采用八角茴香3种溶剂提取物浓度均为0.20 mg/m L,4株绿僵菌Mf82、Ma40、Ma60、Mf04的浓度分别为1×106,1×107,1×106,1×106个孢子/m L 3个浓度梯度。结果表明:12组处理的实际死亡率均显著大于理论死亡率。通过对比c·f值可知:石油醚提取物与黄绿绿僵菌Mf04混合的c·f值为18.48;石油醚提取物与金龟子绿僵菌Ma60混合的c·f值为15.63,此两组混合处理表现为相加作用;而其他10组处理的c·f值均>20,表现为增效作用。3.2低剂量八角茴香提取物和绿僵菌混用对桃蚜的触杀活性采用喷雾法利用低浓度的八角茴香乙醇提取物(0.04 mg/m L)与1×108,1×107,1×106个孢子/m L浓度的几种绿僵菌菌株的孢子悬浮液对桃蚜的触杀活性。结果表明:在处理10 d时,在1×108个孢子/m L浓度下,4种菌株黄绿绿僵菌Mf82、Mf04、金龟子绿僵菌Ma60、Ma40对桃蚜的校正防效分别达100.00%、88.89%、97.37%和98.25%,而未添加八角茴香提取物之前的数值分别为90.35%、65.83%、78.95和83.33%,混用后致死率明显增加;而且LT50也有所缩短,在1×106个孢子/m L浓度下,添加了八角茴香提取物之后4种菌株的LT50分别缩短了3.36d、9.97d、4.88d和2.75d。说明在添加了微量的八角茴香提取物之后,几种绿僵菌对桃蚜的致死率都有提高,且侵染死亡的速度加快。3.3八角茴香提取物和绿僵菌混用对桃蚜的盆栽药效实验利用低浓度(0.04 mg/m L)的八角茴香乙醇提取物和4株绿僵菌的1×108、1×107、1×106个孢子/m L浓度混用,对盆栽甘蓝上的桃蚜进行药效试验,结果表明:在处理甘蓝7d时,在1×108个孢子/m L浓度下,黄绿绿僵菌Mf82、Mf04、金龟子绿僵菌Ma60、Ma40对桃蚜的校正防效分别达88.33%、74.69%、81.43%和86.27%,相同条件下以Mf82菌株的防治效果最好,Mf04的效果最弱。4八角茴香提取物与绿僵菌对桃蚜体内CAT保护酶活性的影响4.1对桃蚜体内CAT活性的浓度效应以0.04 mg/m L的八角茴香乙醇提取物和4种绿僵菌的3种不同浓度1×108,1×107和1×106个孢子/m L对桃蚜进行触杀处理,3d后测定其体内CAT活性,结果表明:添加了微量八角茴香提取物的4种绿僵菌对桃蚜体内的CAT均有抑制作用,随着浓度的升高抑制作用增强;不同菌株中黄绿绿僵菌Mf82对桃蚜体内的CAT抑制作用最强,黄绿绿僵菌Mf04最弱,与触杀效果呈正相关,与未添加八角茴香提取物的4种菌株的毒力对比,前者的抑制作用略强,说明CAT活性的降低可能是导致蚜虫死亡的原因之一。其中0.04 mg/m L的乙醇提取物对桃蚜CAT的抑制活性极微小,但其加入4种绿僵菌菌液之中以后,使绿僵菌对桃蚜体内CAT的抑制作用达到了不同程度的提高。4.2对桃蚜体内CAT活性的时间效应以4种菌株的LC50(黄绿绿僵菌Mf82:9.62×105个孢子/m L,黄绿绿僵菌Mf04:1.29×107个孢子/m L,金龟子绿僵菌Ma60:2.62×106个孢子/m L,金龟子绿僵菌Ma40:8.09×105个孢子/m L)与0.04 mg/m L八角茴香乙醇提取物混用处理桃蚜后,结果显示:处理后24 h时试虫体内的CAT活性均表现出高于对照,表现出被激活,随后的时间里试虫体内CAT活性随着时间的延长均有不同的变化趋势,而且到达最低水平的时间也不同,与未添加0.04 mg/m L八角茴香提取物的4种菌株处理组对比,前者达到最低水平的时间明显缩短。