博落回总碱是由植物博落回提取的一类生物碱,主要成分为血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱等,具有促生长、提高免疫力、杀菌和抗肿瘤等作用。临床上主要用于动物饲养添加剂,但是博落回总碱具有一定的毒性作用,为了避免在生产应用中的毒害作用,特展开此试验,本论文主要研究博落回总碱对孕鼠和胎鼠的毒性以及以博落回总碱为原材料的博普散对种鸡种蛋的生殖毒性。根据文献资料和前期研究,分别设置10、20、40 mg/kg的博落回总碱3个孕鼠染毒组和400、1200、2000 mg/kg的博普散3个产蛋种鸡染毒组,分别进行以下试验。1.博落回总碱对Wistar胎鼠的毒性试验 取健康Wistar妊娠大鼠48只,分为4组,每个组12只,分别为博落回总碱低、中、高剂量染毒组和空白对照组。在妊娠期第7-16 d,给药组孕大鼠按照体重分别给予不同剂量博落回总碱悬浮液(100g*mL-1d-1),空白对照组按照体重给予相应剂量的生理盐水。孕期结束后麻醉孕鼠剖腹产取出胎鼠和孕鼠相关器官,称量孕鼠子宫连体重、胎鼠重,对胎鼠总量、活胎数、死胎数、吸收胎数依次进行统计;胎鼠体长、尾长测量;胎鼠外观、胎鼠内脏骨骼畸形检查。结果表明:高剂量组孕鼠子宫连体重最轻,胎鼠活胎存率仅为2.56%,显著低于其余各组(P<0.05):空白对照组、低剂量组和中剂量组间的胎鼠活胎存率无显著差异(P>0.05),分别为98.15%、96.44%、91.42%;且胎鼠重量、胎鼠体长、尾长等均无显著差异(P>0.05);由于高剂量组基本无胎鼠,以存在显著性差异(P<0.05),所以只统计比较中剂量组和低剂量组。中剂量组胎鼠内脏畸形率26.21%,明显高于空白对照组和低剂量组的7.00%、10.21%,且与空白对照组有显著性差异(P<0.05);胎鼠骨骼畸形率3个组无显著性差异。结果提示:博落回总碱低剂量(10 mg/kg)对胎鼠无胚胎毒性,中剂量(20mg/kg)具有一定的胚胎毒性,主要引起胎鼠内脏发育畸形,高剂量(40 mg/kg)具有严重的胚胎毒性,主要引起胎鼠发育障碍造成死胎及流产。因此可以得出,博落回总碱混悬液致畸试验最大无毒性作用剂量(NOEL)为10mg/kg。最低毒性剂量(LOEL)为20 mg/kg。2.博落回总碱对Wistar孕鼠的毒性试验 取健康Wistar妊娠大鼠48只,分为4组,每个组12只,分别为博落回总碱低、中、高剂量染毒组和空白对照组。在妊娠期第7-16 d给药组孕大鼠按照体重分别给予不同剂量博落回总碱悬浮液(100g*mL-1d-1),空白对照组按照体重给予相应剂量的生理盐水。整个孕期每天记录孕大鼠的采食量和饮水量,孕期结束后麻醉处死孕鼠,采集血液并做相关病理学检查。结果表明:4组孕大鼠的采食量、饮水量及体重增长等均无明显差异;4组血清生化指标、肝、肾组织石蜡切片均未发现组织病理毒性变化,表明博落回总碱高、中、低剂量对孕鼠均无肝肾毒性,并且对孕鼠的生长无明显影响。但是通过孕鼠子宫和卵巢组织切片观察发现,博落回总碱中剂量和高剂量对孕鼠子宫、卵巢具有毒性作用,能够使孕鼠子宫壁肌层变薄,子宫内膜受损,卵泡发育不良,卵泡内颗粒细胞减少;中剂量组和高剂量组孕鼠血清雌激素含量显著低于空白对照组(P<0.05),而促卵泡素和黄体生成素则无明显的变化,孕激素含量则高剂量组最低,中剂量组次之,空白对照组最高,但4组间并无显著性差异(P>0.05)。结果提示:博落回总碱对Wistar孕鼠的毒性试验表明,博落回总碱中剂量(20 mg/kg)和高剂量(40mg/kg)对怀孕大鼠母体无明显的毒性表现,最大无毒性作用剂量(NOEL)可定为40 mg/kg。但能通过抑制卵巢的发育,减少孕鼠体内生殖激素特别是雌二醇的含量,从而产生影响胎鼠发育的毒性作用。3.博普散对种鸡种蛋的生殖毒性本试验选取80只产蛋高峰后期种母鸡,按照随机原则分为4个组,分别是空白对照组、低剂量组(400 mg/kg)、中剂量组(1200 mg/kg)和高剂量组(2000 mg/kg)。将不同剂量的博普散(博落回总碱含量≥1.5%)混饲给药,连续10 d,观察期16 d。通过观察0-1 d、9-10 d和休药后5-6 d的产蛋率、种蛋品质、受精率、孵化率以及苗鸡健康情况和种鸡体重等指标,来判断博普散对种鸡种蛋是否有生殖毒性。从试验结果显示,博普散低、中、高剂量组对种鸡均无生殖毒性,和空白对照组相比,对种鸡的体重、产蛋率和种蛋品质均无影响,对其种蛋受精率和孵化率还有一定程度的增高,说明即使是高剂量组(2000 mg/kg)博普散不仅仅对种鸡无生产毒性,甚至还能够提高其种蛋的受精率和孵化率,有助于种鸡的繁殖。博落回总碱生殖毒性试验表明,博落回总碱致畸毒性试验最低毒性剂量(LOEL)为20 mg/kg,主要引起部分胎鼠的内脏发育畸形;40 mg/kg剂量则具有严重的胚胎毒性,主要引起胎鼠发育障碍造成死胎及流产。其毒性机制可能与抑制卵巢发育,降低孕鼠体内生殖激素尤其是雌二醇的含量相关。博落回总碱对Wistar孕鼠的毒性试验说明,博落回总碱最大无毒性作用剂量(NOEL)为40 mg/kg。种鸡种蛋毒性试验表明,博普散对种鸡种蛋具有较高的安全性,其最大无毒性作用剂量(NOEL)为2000 mg/kg,在临床上按照推荐剂量(400 mg/kg)可以放心使用。