人参皂苷和p-香豆酸对西洋参自毒作用研究

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本文以道地药材西洋参为研究材料,研究了人参皂苷和p-香豆酸与西洋参自毒作用关系。文中采用HPLC检测了3、4年生西洋参根际土壤中3种人参皂苷的含量变化;考察了人参总皂苷和p-香豆酸对西洋参种胚、2年生成株生长的影响;研究了人参总皂苷对西洋参根际真菌生长的影响。主要研究结果如下:1、HPLC检测结果表明,在不同地点的3~4年生西洋参根际土壤中,检测到微量的Rb1、Rb2和Rd三种人参皂苷,其含量数量级在10-1~10μg/g之间。2、采用滤纸片和土壤基质活性测定方法,考察了人参总皂苷对西洋参种胚生长作用。结果发现,在滤纸片活性测定中,人参总皂苷只在125μg/ml时对胚根生长产生显著抑作用,在其余浓度下对种胚生长没有抑制作用;在土壤活性测定中,0.2~125μg/g浓度范围内的人参总皂苷在灭菌土壤均未抑制种胚生长,而125μg/g的人参总皂苷在未灭菌土壤中显著抑制胚芽生长。3、采用营养液培养方法,通过添加不同浓度的人参总皂苷来研究其对2年生西洋参成株生长的影响,结果发现在0.2μg/ml-5μg/ml浓度范围内人参总皂苷对西洋参的表观生长如株高、冠幅、须根重、地上部分生长量没有显著影响。在1μg/ml-25μg/ml浓度范围内,人参总皂苷在第10天和第30天时对西洋参须根内苯丙氨酸解氨酶(PAL)比活力有显著促进作用。在0.2μg/ml-25μg/ml浓度范围内时,人参总皂苷均可显著抑制西洋参净光合速率(Pn),但是对光系统Ⅱ的光化学效率(Fv/Fm)没有显著影响,5μg/ml和25μg/ml的人参总皂苷能够显著减少叶片光和电子传递速率(ETR)。4、采用平板稀释法研究不同浓度人参总皂苷对西洋参根际真菌生长的影响。在10株受试真菌中,人参总皂苷在浓度为0.4mg/ml时,仅对3株木霉菌(Trichoderma brevicompactum)和2株镰刀菌(Fusarium oxysporum,Cl和Fusarium solani,C3)有显著抑制作用,抑制率在12.48%~30.14%之间;在浓度为1mg/ml和4mg/ml时,可显著抑制4株木霉菌(Trichoderma brevicompactum)、1株立枯丝核菌(Rhizoctonia solani, R)、2株镰刀菌(Fusarium oxysporum, C1和Fusarium solani, C3)、1株曲霉菌(Aspergillus pseudodeflectus, FU3 CKI-1-1)的生长,抑制率在14.59%~94.43%之间,而对根病菌镰刀菌(Fusarium solani,F19)和柱孢菌(Cylindrocarpon destructans,B8)生长没有显著抑制作用;在浓度为40mg/ml时,所有10株受试菌株生长均受到显著抑制。5、在滤纸片中,p-香豆酸浓度为1.5mg/ml和7.5mg/ml时,西洋参胚根、胚芽生长完全受到抑制,低于此浓度时,除了0.3mg/g外,种胚生长均未受到显著抑制。在灭菌土壤中,种胚仅在高浓度p-香豆酸(1.5mg/g和7.5mg/g)处理下生长完全受到抑制,在其余浓度下生长并未受到显著抑制。在未灭菌土壤中,p-香豆酸在0.012mg/g-7.5mg/g范围内显著抑制胚根生长,在0.3mg/g-7.5mg/g范围内显著抑制胚芽生长。6、通过在水培营养液中添加三个浓度p-香豆酸,研究其对西洋参成株生长的影响。低浓度p-香豆酸(0.012mg/ml)对西洋参株高、冠幅、地上生长量等没有显著抑制作用,中高浓度p-香豆酸(0.06mg/g和0.3mg/g)对西洋参表观生长的影响多表现为抑制作用。p-香豆酸对西洋参须根内PAL比活力的影响并无明显规律性,在30天培养期内,PAL比活力既可增强也能降低。中高浓度p-香豆酸(0.06mg/ml和0.3mg/ml)均可显著抑制西洋参的净光合速率,但高浓度p-香豆酸(0.3mg/ml)对西洋参叶片ETR和Fv/Fm均没有显著抑制作用。
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