【摘 要】
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本试验以培养的奶牛乳腺上皮细胞系为模型,研究氨基酸、葡萄糖和胰岛素对奶牛乳腺上皮细胞增殖、酪蛋白基因表达和信号蛋白磷酸化的调控作用,探究三者在乳蛋白合成上,哪个更
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本试验以培养的奶牛乳腺上皮细胞系为模型,研究氨基酸、葡萄糖和胰岛素对奶牛乳腺上皮细胞增殖、酪蛋白基因表达和信号蛋白磷酸化的调控作用,探究三者在乳蛋白合成上,哪个更加敏感。试验采用单因子设计(氨基酸:0、0.36、1.8、3.6、5.4、7.2 mmol/L;葡萄糖:0、4.375、8.75、13.123、17.5、35、70 mmol/L;胰岛素:0、25、50、75、100、400、1600 ng/mL)和两个2×2两因子析因设计:氨基酸(0、7.2 mmol/L)与葡萄糖(0、17.5 mmol/L;氨基酸(0、7.2 mmol/L)与胰岛素(0、100 ng/mL)。试验分为三个部分,第一部分主要研究氨基酸、葡萄糖和胰岛素对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响。结果显示添加氨基酸、葡萄糖和胰岛素对细胞增殖有显著的影响(P<0.05)。试验第二部分主要研究氨基酸、葡萄糖和胰岛素对酪蛋白基因mRNA表达的影响,结果表明添加氨基酸、葡萄糖和胰岛素都显著增加CSN3基因mRNA的表达(P<0.01)。第三部分研究氨基酸、葡萄糖和胰岛素对信号蛋白磷酸化的影响,结果显示氨基酸能显著影响mTOR(Ser2448)及下游蛋白S6K1(Thr389)和4EBP1(Thr37/46)的磷酸化(P<0.01);添加葡萄糖能显著降低AMPK(Thr172)的磷酸化(P<0.01);胰岛素能显著影响AKT(Ser473)的磷酸化(P<0.01)。综上所述,添加氨基酸、葡萄糖和胰岛素对奶牛乳腺细胞增殖、酪蛋白基因mRNA表达及蛋白磷酸有显著的影响(P<0.05),且养分之间存在一定的加性效应。
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