FGF5基因的突变可导致多种哺乳动物毛囊生长期的延长以及毛被长度的显著增加,提示可以通过抑制该基因的表达提高阿尔巴斯绒山羊的产绒量。本研究旨在通过基因敲除的方式建立转基因体细胞系,并以该细胞系为核供体进行体细胞核移植,生产敲除FGF5基因的克隆绒山羊。首先,以组织块贴壁法原代培养获得的阿尔巴斯绒山羊胎儿皮肤成纤维细胞生长状态良好,可用于基因打靶和体细胞核移植。其次,转染后经正负筛选共获得51个细胞克隆,扩繁后最终冻存12个克隆。提取基因组DNA进行PCR扩增鉴定得到5个阳性克隆,再提取总RNA进行RT-PCR鉴定后确定其中4个为阳性。与普通成纤维细胞相比,所得敲除FGF5基因阳性细胞克隆在细胞形态、性状及生长特性等方面均发生了极其显著的变化：细胞体积增大；边界模糊,立体感降低；生长速率明显下降；胰蛋白酶消化所需时间明显增加。以转基因阳性细胞克隆为核供体,体外培养成熟的山羊卵母细胞为核受体进行体细胞核移植,形成的重构胚可发育至囊胚期,卵裂的重构胚移植入39只受体羊体内,但未能生产出转基因体细胞克隆山羊。研究认为,细胞形态和生长特性的改变可能受到转染、药物筛选、长期体外培养的影响,也可能与FGF5基因的敲除有关；未能产生出转基因体细胞克隆个体不仅与供体细胞的状态有关,还可能是FGF5基因的敲除影响了重构胚的发育。本研究为采用分子育种手段培养高产绒量阿尔巴斯绒山羊奠定了一定的基础。