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目的:检测正常孕晚期产妇及患重度妊高症产妇胎盘组织中乙酰肝素酶的基因及蛋白表达,同时计数胎盘组织中微血管密度,探讨研究乙酰肝素酶影响胚胎浅表植入的因素。
方法:实验组选取重度妊高症孕妇胎盘组织30例,对照组取正常晚孕产妇胎盘组织30例。运用RT-PCR方法,在紫外灯下观察并进行凝胶扫描,记录扫描结果并测取灰度值,定量检测两组胎盘组织中乙酰肝素酶基因表达。使用抗乙酰肝素酶多克隆抗体、抗CD34单克隆抗体行免疫组织化学sp法染色。在高倍视野下,依切片中细胞胞浆染色的深浅进行光密度值分析,并在高倍视野下计数5个视野内的微血管数,求其均数来表示微血管密度(MVD)。用SPSS13.0软件包对两组资料进行统计分析,P=0.05为检验水平。
结果:免疫组织化学表明,对照组和实验组胎盘组织的绒毛滋养细胞中均表达乙酰肝素酶,乙酰肝素酶主要定位在细胞的胞浆中。乙酰肝素酶蛋白表达平均光密度在对照组为0.2590±0.03178,实验组为0.1710±0.05043,实验组乙酰肝素酶表达低于对照组(P<0.05);微血管密度在对照组中为67.91±16.90,实验组为57.51±15.4,实验组微血管密度低于对照组(P<0.05);Real-time PCR检测胎盘组织中乙酰肝素酶mRNA表达,灰度检测显示:对照组为0.4828±0.04212,实验组为0.7992±0.06500,实验组胎盘组织中乙酰肝素酶mRNA表达低于对照组(P<0.05)。
结论:1.妊娠期高血压疾病胎盘组织中乙酰肝素酶可能通过下调乙酰干素酶mRNA和蛋白的表达,影响胚泡滋养细胞植入能力;2.妊娠期高血压疾病胎盘组织中血管发育不良,子宫胎盘血流灌注不足,使胎盘处于缺血缺氧。