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红藻能通过自身代谢,产生一系列具有特殊结构和活性的天然溴化有机物。近些年来,国内外科研工作者从各种海洋生物体内发现上千种天然溴化有机化合物并相继报道其具有抗菌、细胞毒性以及抗虫等生物活性;同时,科学家发现人工合成的一些溴化物,红藻能够自身生物合成。凹顶藻(Laurencia)属于红藻门、红藻纲、仙菜目、松节藻科,主要分布于热带、亚热带和温带海域潮间带,全球约135种,中国有20种以上,其代谢产物主要包括倍半萜、二萜、三萜和C15-聚乙酰,并具有抗菌、细胞毒性、拒食、驱虫等多种生物活性。因此其一直都是海洋天然药物研究者关注的焦点之一。 本文意在研究粤东地区几种不同凹顶藻属海藻提取物的抗菌活性和细胞毒性的差异,并对提取物的药用价值进行讨论。样品均采自汕头和汕尾沿海地区的5种凹顶藻,分别对其进行提取分离,生物活性筛选。样品经过冷冻干燥后粉碎过筛,索氏提取获得粗提物后进行硅胶柱层析纯化活性物质,高效液相层析分析纯化物。粗提物分别进行抗菌活性和细胞毒性实验,抗菌活性实验结果表明提取物对革兰氏阴性菌的弧菌属(Genus Vibrio)中的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、拟态弧菌(Vibrio mimicus)、河流弧菌(Vibrio fluvialis)具有明显抑菌效果,对其他革兰氏阴性菌如大肠杆菌(E. coli)、嗜水气单孢菌(A.hydrophila)以及革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)无抑菌效果;细胞毒性实验研究发现凹顶藻提取物能够有效抑制癌细胞的生长,不同浓度的提取物对肝癌细胞(HepG2)呈现出不同的毒性效果,对比对正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)发现,提取物对正常细胞没有毒性。粗提物经分离纯化分别得到5个组份,各组分亦进行抗菌活性和细胞毒性实验,其中,主要有抑菌作用的是3号和5号样品各组分,3.2、3.5组份对金黄色葡萄球菌、创伤杆菌、河流弧菌、蜡样芽胞杆菌、枯草杆菌具有抑菌效果,3.3对金黄色葡萄球菌、创伤杆菌、河流弧菌、蜡样芽胞杆菌和拟态弧菌具有抑菌效果,5.2对金黄色葡萄球菌、河流弧菌、蜡样芽胞杆菌、枯草杆菌具有抑菌效果;3.2组份和5.2组份对肾小管上皮细胞(NRK-52E)具有显著的抑增殖效果,1.2、3.2、4.2、5.2组份对肝癌细胞(HepG2)具有明显的抑增殖效果。研究结果表明凹顶藻提取物具有明显的抗菌活性并且具有潜在抗肿瘤药物的潜质。 选取筛选出的几种具有活性的组分,通过Hoechst细胞核染结果发现,3.2、5.2组份对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)毒性较大,其细胞核染颜色深,表明细胞核固缩和核片段化,是细胞凋亡的显著特征;1.2、2.2、4.2组份核染较浅,为淡蓝色,核完整性较好。而各组份对肝癌细胞(HepG2)的毒性都表现出较强的增值效果,其各细胞核染较深,细胞核固缩和核片段化,细胞出现普遍性凋亡。最后对活性提取物高效液相层析(HPLC)发现,活性物质在210nm下,10-30min内分别有几个波峰,峰值大小不一,推测为主要活性物质。本文可以为凹顶藻活性物质的提取提供技术参考,有助于提高凹顶藻的药用价值,实现海藻的高值化利用。