连翘不同部位和不同生长时期连翘叶抗氧化作用的比较与评价

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目的:通过比较连翘不同部位(花、叶、果实)甲醇提取物以及不同生长时期连翘叶(3月-10月)甲醇提取物的清除2, 2 - diphenyl - 1 - picrylhydrazyl (DPPH)和2, 2, - azino - bis (3 - ethylbenzthia - zoline - 6 - sulfonic acid) (ABTS)自由基的能力;总黄酮和总酚酸含量;以及分析各样品中绿原酸、连翘酯苷和芦丁含量及其清除DPPH和ABTS自由基能力的不同;评价连翘不同部位以及不同生长时期连翘叶的抗氧化能力,以及抗氧化成分对其抗氧化能力的贡献。方法:连翘花和连翘叶于2008年3月-10月采摘于河北医科大学校园内,新鲜的连翘花和连翘叶经24-36h烘干,粉碎,过筛(40 mesh),样品粉末脱脂后用60%甲醇超声波提取。采用DPPH自由基清除法和ABTS自由基清除法评价连翘花,叶和果实的抗氧化能力。样品粗提取物总黄酮含量的测定采用亚硝酸钠法,总酚酸含量的测定采用Folin试剂法。利用高效液相色谱法(HPLC)对样品粗提取物中的绿原酸、连翘酯苷和芦丁进行定性与定量分析。采用SPSS13.0分析软件对数据进行统计学处理。结果:1连翘不同部位(连翘花、叶、果实)和不同生长时期(3月-10月)的连翘叶的甲醇提取物清除DPPH和ABTS自由基的能力存在着显著的差异(P < 0.05),采摘于3月连翘叶表现出最高的清除DPPH和ABTS自由基的能力。2连翘不同部位(连翘花、叶、果实)和不同生长时期(3-10月)的连翘叶甲醇提取物中总黄酮和总酚酸含量存在着显著的差异(P < 0.05),采摘于3月连翘叶表现出最高总黄酮含量(15.95 g rutin/100 g)和总酚酸含量(5.13 g gallic acid/100 g)。3连翘花、叶(3-10月)、果实甲醇提取物中总黄酮、总酚酸含量与清除DPPH自由基能力存在显著正相关关系(P < 0.05),其相关系数分别为r =0.892和r =0.841。连翘花、叶(3-10月)、果实甲醇提取物中总黄酮、总酚酸含量与清除ABTS自由基能力之间也存在着显著的正相关关系(P < 0.05),相关系数分别为r =0.952和r =0.870。4连翘不同部位和不同生长时期的连翘叶甲醇提取物中绿原酸、连翘酯苷和芦丁含量存在显著性差异(P < 0.05)。其中采摘于3月连翘叶中绿原酸含量最高,采摘于6月连翘叶中连翘酯苷含量显著高于其他样品,芦丁的最高含量显示在连翘花中。5绿原酸、连翘酯苷、芦丁清除DPPH和ABTS自由基的能力均存在显著差异(P < 0.05),其中清除DPPH自由基能力的顺序为绿原酸>芦丁>连翘酯苷;清除ABTS自由基能力的顺序为绿原酸>连翘酯苷>芦丁。6结合绿原酸、连翘酯苷、芦丁在连翘不同部位和不同生长时期的连翘叶的甲醇提取物中的含量以及各自的清除DPPH、ABTS自由基的能力,评价了这三种抗氧化成分对样品抗氧化能力的贡献,绿原酸是3月连翘叶较强清除自由基作用的主要贡献者,其能贡献3月连翘叶清除DPPH自由基能力的31.54%,贡献清除ABTS自由基能力的53.02%。结论:1 3月连翘叶的抗氧化能力和抗氧化物质含量都显著高于连翘花、连翘果实及其他生长时期连翘叶,这显示从抗氧化方面而言连翘嫩叶刚萌发的时期是最佳的采摘时期,为较好的开发和利用连翘叶提供了理论依据。2 3月连翘叶含有较高的绿原酸,这提示连翘嫩叶可作为绿原酸的新的植物来源。
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