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前言 AS是严重危害人类健康的常见病,病变好发于大、中型动脉,在我国60岁以上人中发病率高达79.9%。ASO为AS病变继发血栓形成,以致发生动脉管腔狭窄或闭塞,以腹主动脉下端、髂动脉及股、腘动脉常见。本病的发生在西方国家较为多见,在我国随着生活水平的不断提高和血管外科诊断技术的不断发展,ASO亦有增加趋势,且愈加年轻化。ASO的病因至今尚不完全清楚,据流行病学调查,本病的危险因素有高脂血症、高血压、吸烟、糖尿病及遗传因素等。近年来,有学者提出感染性因素可能对AS的发生发展起作用,其中Chp对动脉硬化损伤可能有一定关系。本研究采用PCR法对下肢ASO患者静脉血中Chp的DNA表达进行检测,旨在探讨Chp与ASO发生发展的关系,对该病的治疗有积极作用。 实验材料 收集60例下肢ASO患者的静脉血标本,加EDTA抗凝,-20℃保存。40例正常人的静脉抗凝血作为对照组。 实验方法 采用PCR法检测下肢ASO患者静脉血中Chp DNA的表达。①标本的收集:经数字减影血管造影证实为下肢ASO的患者,抽取静脉全血2ml,注入EDTA抗凝的真空试管中,-20℃保存,对照组标本同法收集;②提取DNA:以取氯仿提取血细胞中的DNA;③PCR扩增:以 DNA为模板,选择相应的引物,扩增 ChP的基因片段;④扩增产物的检测:取PCR扩增产物进行聚丙烯醉胺凝胶电泳,摄下并保存电泳图象;⑤统计学分析以‘检验。 实 验 结 果 6 0例下肢 ASO患者静脉血中 ChpDNA表达阳性率为78.33%卜7/60入40例正常人静脉血中ChpDNA表达阳性率为47·50%门9八0人两组ChPDNA阳性表达差异有显著性意义(X‘=10.36,P<0.05)。 下肢ASO患者不同时期ChPDNA表达阳性率分别为3 3.33%、73.68畅、86.96防和gi.67畅。随着病情的力重,ChpDNA表达阳性率增高,ASO各期之间的差异有显著意义(X‘二9.60,P<0.05)。 讨 论 AS是个多因素疾病,其危险因素包括高血压、高脂血症、糖尿病、吸烟、年龄及遗传因素等,近年来研究认为Chp可能导致AS损伤。ASO为AS病变继发血栓形成,以致发生动脉管腔狭窄或闭塞。既然ChP可引起AS,即有可能对ASO的发生发展起作用。 一人hP在ASO发生中的作用 ChP导致AS可能的机制是:ChP由呼吸道进人血流,传播到血管组织,感染巨噬细胞,内皮细胞及平滑肌细胞,并可在细胞内”增殖,当ChP多糖同低密度脂蛋白结合,产生抗原体或对内皮细胞产生毒素,诱发AS。本研究中,ASO患者ChpDNA阳性表达率高于对照组,表明ChP与ASO发病有一定联系。 ·2· 二人hp与ASO严重程度的关系 本研究表明,ChPDNA的阳性表达率随ASO的严重程度而升高,说明ChP与ASO病变程度相关,即ChpDNA表达的变化取决于动脉本身病变、闭塞远端血管及侧枝血管内皮细胞的损伤程度。 三工hpDNA检测的临床意义 本研究证实 Chp与 ASO的&4发展有一定联系,并从基因角度探讨ChP与ASO的关系,为大环内酯类药物和基因治疗该疾病提供理论依据。 结 论 *下肢 ASO患者静脉血中 ChPDNA的表达水平高于对照组的水平,提示ChP与该病的发生存在一定联系。 2.ChpDNA表达水平与ASO的严重程度成正相关。