单纯疱疹病毒(HSV)可分为HSV-1和HSV-2两种血型。HSV-2型可引起生殖器疱疹、新生儿疱疹等，其中新生儿疱疹的病死率高达60％，孕妇感染后是造成婴儿先天畸形的主要病原体，同时对孕妇也可引起严重病变，如坏死性肝炎等，病死率达50％，也是器官移植及AIDS病人并发感染死亡的常见原因之一。并认为与宫颈癌的发生有关。因此感染HSV的早期诊断及分型具有重要意义。 目前国内外单疱疹病毒分型方法大概有PCR直接分型、单克隆抗体法、免疫学检测。由于PCR检测操作过程的高要求和易出现假阳性；单克隆抗体分型法有较大的实用性，但有时表现为不完全特异性；核酸探针技术操作烦琐，造价高，应用受限；免疫血清学中的ELISA法，简便快速、灵敏度高、价格低廉、。国内用于检测用抗原大多还依赖进口，寻求一种特异性高，纯度高，价格低廉的抗原具有现实意义。 随着基因工程技术的发展，基因工程抗原逐渐代替传统的抗原广泛的应用于各种检测，基因工程抗原结构单纯，性质稳定，特异性高。 目的:该项研究的主要目的是用基因工程方法表达HSV-Ⅱ血清型特异性抗原，代替传统的病毒检测抗原制备试剂盒，以提高检测的特异性，敏感性，降低检测成本，促进病毒检测的发展。 方法:根据genebank所查的HSV-2gG-2基因和相关文献选取特异片断，设计引物，用PCR方法调取基因，将PCR产物切胶回收后与pET-30a载体连接，转化DH5α，筛选。对阳性菌落测序后，将带有目的基因的质粒转入BL21菌株，经IPTG诱导表达，SDS-PAGE检测蛋白的表达，用westen方法鉴定蛋白抗原性，用交叉连续稀释分析法滴定抗原滴度，然后包被酶标板制作试剂盒，与传统HSV-Ⅱ、HSV-Ⅰ抗原制作的试剂盒、PCR试剂盒比较其阳性符合率，阴性符合率，其敏感性，特异性为。将试剂盒放置不同温度条件(4℃、37℃、室温)不同时间(6月、10d、3月)后，与新鲜制作的试剂盒比较研究了试剂盒的稳定性。并初步应用于临床性病患者的标本检测。 结果:1、工程菌表达的目的蛋白具有预期抗原活性;2、用纯化基因工程抗原包被酶标板制备了IgM检测试剂盒;3、用基因工程抗原制作的试剂盒与传统试剂盒比较，其阳性符合率为70％，阴性符合率为96.7％。表明基因工程抗原制作的试剂盒特异性高，敏感性强。与PCR试剂盒比阳性符合率为83.3％，阴性符合率为86.7％，有较高的符合率，且假阳性率低。表明基因工程抗原试剂盒的可行性。稳定性试验结果，表明所建立的试剂盒稳定可靠，易于4℃长期存放、相对较高温度的短期存放(如运输等)，利于推广使用;4、性病患者HSV-2的感染率是36.7％。 结论:1.用得到的纯化基因工程抗原建立了HSV-2检测试剂盒，该试剂盒可推广应用临床检测;2.临床性病患者中HSV-2血清流行病学初步调查研究结果：感染率是36.7％。